[发明专利]细胞分泌分析的装置和方法

权利要求书

1.鉴定包含抗体分泌细胞(ASC)的细胞群的方法，所述抗体分泌细胞显示可归因于所述抗体分泌细胞的分泌抗体的细胞外效应，其包括：

在微流体装置中保留各自包含10至100个细胞的多个细胞群，所述微流体装置包括第一组件和第二组件，其中所述第一组件被配置为与第二组件形成可逆密封；

其中所述第一组件包括多个不同开放室，其各自具有1的平均纵横比，其中所述平均纵横比是室高度与最小横向尺寸的比，以及其中所述多个细胞群的每个个体细胞群被保留在不同的开放室；

其中所述第二组件包括：

(a) 开放通道和位于所述第一组件中不同开放室之间的多个下推阀结构；

(b) 开放通道和位于所述第一组件中不同开放室之间的多个隔离间隔物；或

(c) 微通道的导管，其在所述第一组件中开放室上方对齐；

在所述第一组件和所述第二组件之间形成所述可逆密封；

通过驱动所述下推阀结构，通过增加压力而倒塌所述隔离间隔物，或相对于所述第一组件平移所述第二组件，使所述第一组件中不同开放室彼此隔离，从而形成多个不同隔离室；

其中所述多个细胞群中的至少一个个体细胞群包含一种或多种ASC，

其中所述多个不同开放室或其子集中的单个开放室还包括包含一种或多种读出颗粒的读出颗粒群，

孵育所述不同隔离室中的内容物，

分析多个所述不同隔离室或其子集中细胞外效应的存在，其中所述读出颗粒群或其亚群提供所述细胞外效应的直接或间接读出，以及

基于分析步骤的结果确定所述多个细胞群中的所述一种或多种ASC是否表现出所述细胞外效应。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述微流体装置的第一组件包括位于所述不同开放室之间的多个隔离间隔物，并且所述微流体装置的第二组件是平的且未图案化。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述ASC是B细胞、杂交瘤细胞、工程化以产生抗体的重组细胞、或者它们的组合。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述读出颗粒群中的一种或多种包含一种或多种读出珠、一种或多种读出细胞或其组合。

5.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述多种读出颗粒群或其子集包含表达在其表面的G蛋白偶联受体(GPCR)或溶解性GPCR的一种或多种读出细胞，以及所述细胞外效应是所述GPCR的拮抗作用、所述GPCR的激动作用、或者所述一种或多种ASC分泌的抗体与所述GPCR的结合。

6.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述多种读出颗粒群或其子集包含在其表面表达离子通道的一种或多种读出细胞，以及所述细胞外效应是所述离子通道的拮抗作用、所述离子通道的激动作用、或者所述一种或多种ASC分泌的抗体与所述离子通道的结合。

7.根据权利要求1或2所述的方法，其中用抗原或表位将所述读出颗粒群中的一种或多种功能化。

8.根据权利要求1或2所述的方法，其中用抗体结合部分将所述读出颗粒群中的一种或多种功能化。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述抗体结合部分是蛋白A、蛋白A/G、蛋白G、结合免疫球蛋白的单克隆抗体、结合免疫球蛋白的单克隆抗体片段、结合免疫球蛋白的多克隆抗体、结合免疫球蛋白的多克隆抗体片段、或者它们的组合。

10.根据权利要求1或2所述的方法，其中经通过液柱产生的静水压力、通过分配仪器、或者通过上下移动所述第二组件或所述第一组件以引起流体转移到所述不同开放室中而将所述多个细胞群装载到所述不同开放室中。

11.根据权利要求1或2所述的方法，其中经通过液柱产生的静水压力、通过分配仪器、或者通过上下移动所述第二组件或所述第一组件以引起流体转移到所述不同开放室而将所述多种读出颗粒群或其子集装载到所述不同开放室中。