[发明专利]PD-1和4-1BB的融合蛋白

权利要求书

1.一种融合蛋白，所述融合蛋白包含

（a）位于其N-端的PD-1细胞外结构域，所述PD-1细胞外结构域由SEQ ID NO: 2的氨基酸序列组成；

（b）PD-1跨膜结构域，所述PD-1跨膜结构域由SEQ ID NO: 8的氨基酸序列组成；和

（c）位于其C-端的4-1BB细胞内结构域，所述4-1BB细胞内结构域由SEQ ID NO: 4的氨基酸序列组成。

2.根据权利要求1所述的融合蛋白，所述融合蛋白进一步包含CD3ζ结构域。

3.根据权利要求1或2所述的融合蛋白，其特征在于，所述细胞外结构域不包含接头或铰链结构域。

4.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述PD-1细胞外结构域和/或跨膜结构域是人PD-1。

5.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述4-1BB细胞内结构域是人4-1BB。

6.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述PD-1细胞外结构域由SEQ ID NO:2的氨基酸序列组成，

其中，所述融合蛋白显示出人PD-L1/2结合亲和力。

7.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述4-1BB细胞内结构域由SEQ IDNO: 4的氨基酸序列组成，

其中，所述融合蛋白在经转导、转化或以其他方式引入到CD8⁺ T细胞中时，能够在所述CD8⁺ T细胞用PD-L1/2⁺靶细胞刺激时提高所述CD8⁺ T细胞的增殖率。

8.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述PD-1跨膜结构域由SEQ ID NO: 8的氨基酸序列组成，

其中，所述融合蛋白在经转导、转化或以其他方式引入到CD8⁺ T细胞中时，能够在所述CD8⁺ T细胞用PD-L1/2⁺靶细胞刺激时增加IFNγ和/或IL-2的分泌。

9.一种编码权利要求1至8中任一项所述的融合蛋白的核酸分子。

10.一种包含权利要求9所述的核酸分子的载体。

11.一种包含权利要求9所述的核酸分子或权利要求10所述的载体的宿主细胞。

12.根据权利要求11所述的宿主细胞，所述宿主细胞用权利要求9所述的核酸分子或权利要求10所述的载体转导。

13.根据权利要求11或12所述的宿主细胞，其特征在于，所述核酸分子或所述载体稳定地整合到所述宿主细胞的基因组中。

14.根据权利要求12所述的宿主细胞，所述宿主细胞经由逆转录病毒转导被转导。

15.根据权利要求11所述的宿主细胞，所述宿主细胞稳定地表达权利要求9所述的核酸分子编码的融合蛋白。

16.根据权利要求11所述的宿主细胞，所述宿主细胞是CD8⁺ T细胞。

17.一种制备权利要求11至16中任一项所述的宿主细胞的方法，所述方法包括：

（1）用权利要求9所述的核酸分子或权利要求10所述的载体转导宿主细胞；

（2）在允许所述细胞生长和表达由所述核酸分子或所述载体编码的所述融合蛋白的适合的培养基中培养步骤（1）的转导的所述宿主细胞；

（3）从所述培养基中收集所述宿主细胞。