[发明专利]基因组编辑系统和方法有效
申请号: | 201780035094.8 | 申请日: | 2017-12-27 |
公开(公告)号: | CN109689875B | 公开(公告)日: | 2021-07-27 |
发明(设计)人: | 李伟;周琪;滕飞 | 申请(专利权)人: | 中国科学院动物研究所 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;C12N15/85;C12N15/90;A61K48/00;A61K38/46;A61P35/00;A61P29/00;A61P25/16;A61P9/00;A61P25/28;A61P25/30;A61P25/18;A61P25/00;A61P27/02 |
代理公司: | 北京永新同创知识产权代理有限公司 11376 | 代理人: | 程大军;栾星明 |
地址: | 100101 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基因组 编辑 系统 方法 | ||
1.一种用于对细胞基因组中的靶序列进行定点修饰的基因组编辑系统,其包含以下i)至v)中至少一项:
i) C2c1蛋白,和向导RNA;
ii) 包含编码C2c1蛋白的核苷酸序列的表达构建体,和向导RNA;
iii) C2c1蛋白,和包含编码向导RNA的核苷酸序列的表达构建体;
iv) 包含编码C2c1蛋白的核苷酸序列的表达构建体,和包含编码向导RNA的核苷酸序列的表达构建体;
v) 包含编码C2c1蛋白的核苷酸序列和编码向导RNA的核苷酸序列的表达构建体;
其中所述向导RNA能够与所述C2c1蛋白形成复合物,将所述C2c1蛋白靶向所述细胞基因组中的靶序列,导致所述靶序列中的一或多个核苷酸的取代、缺失和/或添加,
其中所述C2c1蛋白是来自Alicyclobacillus acidiphilus的AaC2c1蛋白,其中所述AaC2c1蛋白由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列组成。
2.权利要求1的系统,其中所述向导RNA是sgRNA。
3.权利要求2的系统,所述sgRNA由选自以下之一的核酸序列编码:
5’-GTCTAAAGGACAGAATTTTTCAACGGGTGTGCCAATGGCCACTTTCCAGGTGGCAAAGCCCGTTGAACTTCTCAAAAAGAACGCTCGCTCAGTGTTCTGACGTCGGATCACTGAGCGAGCGATCTGAGAAGTGGCAC-Nx-3’;
5’-AACTGTCTAAAGGACAGAATTTTTCAACGGGTGTGCCAATGGCCACTTTCCAGGTGGCAAAGCCCGTTGAACTTCTCAAAAAGAACGCTCGCTCAGTGTTCTGACGTCGGATCACTGAGCGAGCGATCTGAGAAGTGGCAC-Nx-3’;
5’-CTGTCTAAAGGACAGAATTTTTCAACGGGTGTGCCAATGGCCACTTTCCAGGTGGCAAAGCCCGTTGAACTTCTCAAAAAGAACGCTCGCTCAGTGTTCTGACGTCGGATCACTGAGCGAGCGATCTGAGAAGTGGCAC-Nx-3’;
5’-GTCTAAAGGACAGAATTTTTCAACGGGTGTGCCAATGGCCACTTTCCAGGTGGCAAAGCCCGTTGAACTTCTCAAAAAGAACGCTCGCTCAGTGTTATCACTGAGCGAGCGATCTGAGAAGTGGCAC-Nx-3’;
5’-GTCTAAAGGACAGAATTTTTCAACGGGTGTGCCAATGGCCACTTTCCAGGTGGCAAAGCCCGTTGAACTTCTCAAAAAGAACGATCTGAGAAGTGGCAC-Nx-3’;
5’-GTCTAAAGGACAGAATTTTTCAACGGGTGTGCCAATGGCCACTTTCCAGGTGGCAAAGCCCGTTGAACTTCTCAAAAAGCTGAGAAGTGGCAC-Nx-3’;
5’-GTCTAAAGGACAGAATTTTTCAACGGGTGTGCCAATGGCCACTTTCCAGGTGGCAAAGCCCGTTGAACTTCTCAAAGCTGAGAAGTGGCAC-Nx-3’;
5’-GTCTAAAGGACAGAATTTTTCAACGGGTGTGCCAATGGCCACTTTCCAGGTGGCAAAGCCCGTTGAACTTCTCAAAACTGAGAAGTGGCAC-Nx-3’;
5’-GTCTAAAGGACAGAATTTTTCAACGGGTGTGCCAATGGCCACTTTCCAGGTGGCAAAGCCCGTTGAACTTCTCAAGCGAGAAGTGGCAC-Nx-3’;
5’-GTCTAAAGGACAGAATTTTTCAACGGGTGTGCCAATGGCCACTTTCCAGGTGGCAAAGCCCGTTGAACTTCTAAGCAGAAGTGGCAC-Nx-3’;和
5’-GTCTAAAGGACAGAATTTTTCAACGGGTGTGCCAATGGCCACTTTCCAGGTGGCAAAGCCCGTTGAACTTCAAGCGAAGTGGCAC-Nx-3’;
其中Nx表示X个连续的核苷酸组成的核苷酸序列,其能够与靶序列的互补序列特异性杂交,N各自独立地选自A、G、C和T;X为18≤X≤35的整数。
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