[发明专利]包含融合Rv2299c和早期分泌抗原靶-6的蛋白质的树突状细胞成熟化促进用组合物

说明书

本发明涉及树突状细胞成熟化诱导组合物及使树突状细胞成熟的方法。更具体地，涉及包含来源于结核杆菌（M.tuberculosis）的融合Rv2299c和早期分泌抗原靶‑6（ESAT‑6）的蛋白质作为有效成分的树突状细胞成熟化诱导组合物及将利用其的未成熟树突状细胞分化成树突状细胞的方法。根据本发明的方法能够增强由树突状细胞引起的身体免疫反应。

技术领域

本发明涉及树突状细胞的成熟化诱导组合物及使树突状细胞成熟的方法。更具体地，涉及包含来源于结核杆菌（M.tuberculosis）的融合Rv2299c和早期分泌抗原靶-6（ESAT-6）的蛋白质的树突状细胞成熟化诱导组合物以及将利用其的未成熟树突状细胞分化为成熟树突状细胞的方法。

背景技术

结核杆菌（Mycobacterium tuberculosis，Mtb）是最成功的的人类病原菌中的一个，全世界人口的三分之一感染了结核杆菌（Kaufmann，2001）。由于作为目前所使用的唯一疫苗的牛型结核杆菌卡介苗（BCG）对抗成人结核（Tuberculosis，TB）没有显著的防御效果（Brandt et al., 2002），因此需要可代替或促进卡介苗的更有效的疫苗。重要的是确认与预防免疫诱导相关的分枝杆菌抗原并对特征进行说明，以便能够开发有希望的结核（TB）疫苗候选。但是，许多抗原已用于制备目前处于不同阶段的临床试验中的结核疫苗（Ahsan，2015）。

Th1免疫反应对结核杆菌感染的限制是必须的，这通过对与干扰素γ（IFN-γ）及白介素-12（IL-12）途径相关的具有基因破坏或突变的小鼠或人类的分枝杆菌感染的增加的敏感性来证明（van Crevel et al., 2002）。因此，许多关于结核疫苗的研究都集中在强大的T细胞刺激抗原，如抗原85复合体（Ag85）及早期分泌抗原靶-6等（Yuk and Jo，2014）。由于调节感染所必须的T细胞反应很少从被感染的人或动物去除结核杆菌（Feldman andBaggenstoss，1938，Rhoades et al., 1997，Grace and Ernst，2016），因此这些抗原可在小鼠中诱导强健的预防免疫，但它不能诱导完整的杀菌免疫（Weinrich Olsen et al.,2001，Aagaard et al., 2011）。

树突状细胞（dendritic cells，DC）在免疫体系中是最有效的抗原递呈细胞，是起到先天免疫和适应性免疫的桥梁作用的重要细胞。结核杆菌通过操作树突状细胞功能来延迟T细胞反应的开始，从而可确保菌增殖的时间（Gallegos et al., 2008，Hanekom etal., 2003，Wolf et al., 2007，Cooper, 2009），因而示唆能够以潜伏形态存活。因此，与T细胞刺激一同树突状细胞的初期活性及向淋巴结的树突状细胞迁移是用于诱导对结核杆菌感染有效的预防的关键因素。此结果表明，通过树突状细胞活化引起有效宿主预防免疫的分枝杆菌抗原是开发结核疫苗的有望的靶标。实际上，被卡介苗感染或暴露于结核杆菌抗原的树突状细胞在小鼠模型中对正常和大量的病毒性结核杆菌感具有显著的预防效果（Demangel et al., 1999, Rubakova et al., 2007）。但是，虽然已鉴定了几种激活树突状细胞的分枝杆菌蛋白质，以使Th1免疫反应启动（Byun et al., 2012b），但是对于作为这些具体的抗结核免疫机制及疫苗的蛋白质的预防效果知之甚少。