[发明专利]用于从干细胞和/或祖细胞生成祖T细胞的方法及其用途在审
| 申请号： | 201780036073.8 | 申请日： | 2017-04-07 |
| 公开（公告）号： | CN109312307A | 公开（公告）日： | 2019-02-05 |
| 发明（设计）人： | 彼得·W·赞德斯彻;施芮娅·舒克拉 | 申请（专利权）人： | 多伦多大学管理委员会 |
| 主分类号： | C12N5/0797 | 分类号： | C12N5/0797;A61K35/17;C12N5/0783 |
| 代理公司： | 北京安信方达知识产权代理有限公司 11262 | 代理人： | 王玮玮;郑霞 |
| 地址： | 加拿大*** | 国省代码： | 加拿大;CA |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 干细胞 祖细胞 体外 细胞 内容提供 血管粘附 无血清 体内 暴露 | ||
1.一种从干细胞和/或祖细胞生成祖T细胞的方法，所述方法包括：
-在无血清条件下，在Notch配体δ样4(DL4)的至少部分和血管粘附分子1(VCAM-1)的至少部分的存在下培养干细胞和/或祖细胞以生成祖T细胞。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述培养步骤还包括生成所生成的祖T细胞的衍生物。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其中DL4的部分包含DL4的细胞外结构域。
4.根据权利要求3所述的方法，其中DL4的部分被吸附或固定至基底上。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中VCAM-1的部分包含SEQ ID NO:4的Phe25-Glu698，所述Phe25-Glu698与人类IgG1的Fc区融合。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中VCAM-1的部分被固定至基底上。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中DL4的部分以在7.5μg/mL至20μg/mL的范围内的浓度提供。
8.根据权利要求7所述的方法，其中DL4的部分以约15-20μg/mL的浓度提供。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中VCAM-1的部分以在0.15μg/mL至5.3μg/mL的范围内的浓度提供。
10.根据权利要求9所述的方法，其中VCAM-1的部分以约2.5-5.3μg/mL的浓度提供。
11.根据权利要求1至10中任一项所述的方法，其中所述干细胞和/或祖细胞的培养包括将所述干细胞和/或祖细胞暴露于包含SCF、FLT3L和IL-7的造血分化培养基。
12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法，其中所述干细胞和/或祖细胞是人类细胞。
13.根据权利要求1至12中任一项所述的方法，其中所述干细胞和/或祖细胞是多能干细胞或造血干祖细胞。
14.一种通过权利要求1至13中任一项所述的方法生成的祖T细胞的分离的群体。
15.根据权利要求14所述的分离的群体，其中所述分离的群体包含所述祖T细胞的衍生物。
16.根据权利要求14或15所述的分离的群体，其中所述群体包含至少20％的CD7+祖T细胞。
17.根据权利要求15所述的分离的群体，其中所述群体包含至少60％的CD7+祖T细胞。
18.根据权利要求14至17中任一项所述的分离的群体，其中所述祖T细胞是表达CD7的人类细胞。
19.根据权利要求18所述的分离的群体，其中所述人类祖T细胞表达CD34、CD45RA和CD5中的一种或更多种。
20.一种用于增加有相应需要的受试者中的T细胞数目的方法，所述方法包括将有效数目的根据权利要求14至19中任一项所述的祖T细胞施用至所述受试者。
21.根据权利要求20所述的方法，其中所述受试者是人类。
22.根据权利要求21所述的方法，其中所施用的祖T细胞是自体的。
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