[发明专利]用于分析物检测的方法、组合物和传感器

说明书

一种测试液体样品中分析物存在的方法，该方法包括以下步骤：通过使样品与组合物接触形成混合物，该组合物包含用于从分析物形成过氧化氢的氧化酶、能够在氧自由基和铁化合物存在下形成荧光指示剂的荧光指示剂前体，其中铁化合物溶解于所述混合物中；照射所述混合物；和测量来自荧光指示剂的荧光。使用装置进行该方法，其中通过来自光源(103)的光照射微流体装置的通道或腔室(101)中的混合物，以及通过光检测器(105)检测来自荧光指示剂的发光。

发明领域

本发明涉及通过荧光信号检测分析物的方法，用于产生所述信号的组合物和用于实施所述方法的传感器。

背景技术

芬顿试剂是过氧化氢与铁(II)化合物的溶液，其用于通过铁(II)化合物的歧化形成氧自由基：

Fe²⁺+H₂O₂→Fe³⁺+HO·+OH^-

Fe³⁺+H₂O₂→Fe²⁺+HOO·+H⁺

Woodward,J.等人‘Coupling of glucose oxidase and Fenton’s reaction fora simple and inexpensive assay of beta-glucosidase’EnzymeMicrob.Technol.1985,7,449-453公开了在硫酸亚铁氧化成硫酸铁时紫外光吸收的增加。提出了葡萄糖氧化酶和芬顿试剂的测定(assay)，用于测量酶如纤维素和β-葡糖苷酶的活性。

Jiang,Y.等人‘Colorimetric detection of glucose in Rat Brain UsingGold Nanoparticles’Angew.Chem.Int.Ed.2010,49,4800-4804公开了基于金纳米颗粒的测定，其基于吸光度的变化对鼠脑中的葡萄糖进行直接比色可视化。

Hu,R.等人‘An efficient fluorescent sensing platform for biomoleculesbased on Fenton reaction triggered molecular beacon cleavage’Biosens.Bioelectron.2013,41,442-445公开了含有荧光团和猝灭剂的分子信标。通过葡萄糖氧化酶对葡萄糖的作用原位形成的羟基自由基使分子信标分裂，从而引起荧光团和猝灭剂的分离。

Chih,T.等人‘Glucose sensing based on effective conversion of O₂andH₂O₂ into superoxide anion radical with clay minerals’J.Electroanal.Chem.2005,581,159-166公开了用蒙脱石K10粘土矿物从H₂O₂和O₂产生超氧阴离子自由基，其特征在于使用安普莱克司红(amplex red)和超氧化物歧化酶作为探针的荧光测定。

本发明的一个目的是提供一种用于检测分析物的方法，从该分析物可以形成过氧化氢，其能够检测低浓度的分析物。

本发明的另一个目的是提供一种用于检测分析物的方法，从该分析物可以形成过氧化氢，其能够检测跨宽的浓度范围的分析物。

本发明的又一目的是提供一种用于检测分析物的低成本的测定，从该分析物可以形成过氧化氢。

发明概述

在第一方面，本发明提供了一种测试液体样品中是否存在分析物的方法，该方法包括以下步骤：