[发明专利]polX家族的DNA聚合酶的变体在审
| 申请号： | 201780037427.0 | 申请日： | 2017-06-13 |
| 公开（公告）号： | CN109477080A | 公开（公告）日： | 2019-03-15 |
| 发明（设计）人： | 托马斯·伊贝尔特;马克·德拉吕 | 申请（专利权）人： | DNA斯克瑞普特公司;巴斯德研究所;国家科学研究中心 |
| 主分类号： | C12N9/12 | 分类号： | C12N9/12;C12P19/34 |
| 代理公司： | 北京安信方达知识产权代理有限公司 11262 | 代理人： | 王玮玮;郑霞 |
| 地址： | 法国*** | 国省代码： | 法国;FR |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 变体 合成核酸分子 功能片段 核酸分子 核苷酸 聚合酶 模板链 位置处 残基 修饰 突变 合成 | ||
1.一种polX家族的DNA聚合酶的变体或该聚合酶的功能片段的变体，所述聚合酶能够在没有模板链的情况下合成核酸分子，所述变体包含在选自由E457、T331、G332、G333、F334、R336、K338、H342、D343、V344、D345、F346、A397、D399、D434、V436、A446、L447、L448、G449、W450、G452、R454、Q455、F456、R458、R461、N474、E491、D501、Y502、I503、P505、R508、N509和A510组成的组的至少一个位置处的残基或功能等同的残基的至少一个突变，所示位置通过与SEQ ID NO:1比对确定。
2.根据权利要求1所述的polX家族的DNA聚合酶的变体，所述变体能够合成DNA链和/或RNA链。
3.根据权利要求1或2所述的polX家族的DNA聚合酶的变体，所述变体为Pol IV、Polμ或末端脱氧核糖核苷转移酶(TdT)的变体。
4.根据前述权利要求之一所述的polX家族的DNA聚合酶的变体，所述变体与根据SEQID NO:1的序列具有至少60％的同一性，优选地与根据SEQ ID NO:1的序列具有至少70％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％的同一性。
5.根据前述权利要求之一所述的polX家族的DNA聚合酶的变体，其中至少一个突变由一个或更多个氨基酸残基的取代、缺失或添加组成。
6.根据前述权利要求之一所述的polX家族的DNA聚合酶的变体，所述变体包含在选自由T331、G332、G333、F334、R336、D343、L447、L448、G449、W450、G452、R454、Q455、E457、R461和R508组成的组的至少一个位置处的残基或功能等同的残基的至少一个突变，优选地在选自由R336、R454和E457组成的组的至少一个位置处的残基或功能等同的残基的至少一个突变，所示位置通过与SEQ ID NO:1比对确定。
7.根据前述权利要求之一所述的polX家族的DNA聚合酶的变体，所述变体包含在选自由R336、R454和E457组成的组的至少两个位置处的残基的至少一个突变，优选地在所述三个位置R336、R454和E457处的残基的突变。
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