[发明专利]细胞内递送生物分子以诱导耐受性

说明书

本发明提供了用于通过使含有免疫细胞的细胞悬浮液通过缩窄部来诱导对抗原的耐受性或阻抑对抗原的免疫应答的方法，其中该缩窄部使该细胞变形从而引起该细胞的扰动，使得抗原和/或致耐受性因子进入该细胞，从而产生致耐受性和/或免疫抑制性免疫细胞。在一些实施方案中，将该致耐受性和/或免疫抑制性免疫细胞递送至个体，并且对该抗原的呈递诱导了对该抗原的耐受性和/或阻抑了对该抗原的免疫应答。

相关申请

本申请要求于2016年5月3日提交的美国临时申请号62/331,384的优先权，将其通过引用以其全文特此结合。

技术领域

本公开文本总体上涉及通过使细胞悬浮液通过使细胞变形的缩窄部将化合物递送至细胞来阻抑免疫应答或诱导耐受性的方法。

背景技术

不希望的免疫应答促成自身免疫、移植排斥、过敏和抗药物应答。当生物体产生抗自身应答时，自身免疫就会发生，通常是由于对自身抗原的免疫应答失调。自身免疫疾病包括例如I型糖尿病、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、自身免疫性溶血性贫血和多发性硬化症。在接受生物体中移植供体器官后的致病性免疫应答可导致移植物排斥并降低患者存活。此外，针对食物和环境抗原的不需要的免疫应答驱动过敏性疾病，诸如哮喘、食物过敏和特应性皮炎。因此，建立对抗原的免疫耐受性的方法是大量治疗性开发的热点。

目前的细胞内递送方法在调节细胞表型或功能以诱导抗原特异性耐受方面是无效的。因此，存在对如下的尚未满足的需求：可以将抗原和致耐受性因子加载到细胞的细胞质中并且驱动强有力的免疫抑制应答以用于治疗导致自身免疫疾病和移植排斥的致病性免疫应答的细胞内递送技术。描述使用微流体缩窄部将化合物递送至细胞的方法的参考文献包括WO 2013059343、WO 2015023982、WO 2016070136、WO 2016077761和PCT/US 2016/13113。

本文引用的所有参考文献(包括专利申请和出版物)均通过引用以其全部内容而并入。

发明内容

本发明提供了在个体中诱导对抗原的耐受性的方法，该方法包括使包含免疫细胞的细胞悬浮液通过缩窄部，其中所述缩窄部使细胞变形从而引起该细胞的扰动，这样使得抗原和/或致耐受性因子进入该免疫细胞，其中产生致耐受性免疫细胞；并且将该免疫细胞引入该个体。在一些实施方案中，该致耐受性免疫细胞能够例如通过所述致耐受性免疫细胞对所述抗原的呈递诱导对该抗原的耐受性。在一些实施方案中，致耐受性因子调节共刺激分子的活性和/或表达、调节免疫抑制分子的活性和/或表达、调节炎性分子的活性和/或表达和/或另一免疫细胞的模块活性。

本发明的某些方面提供了一种用于在个体中阻抑免疫应答的方法，该方法包括使包含免疫细胞的细胞悬浮液通过缩窄部，其中所述缩窄部使该细胞变形从而引起该细胞的扰动，这样使得抗原和/或致耐受性因子进入该免疫细胞，其中产生免疫抑制性免疫细胞；并且将该免疫细胞引入该个体中。在一些实施方案中，所述免疫抑制性免疫细胞对所述抗原的呈递阻抑了对该抗原的免疫应答。

本发明的某些方面提供了一种用于在个体中诱导对抗原的耐受性的方法，该方法包括将免疫细胞引入该个体中，其中该免疫细胞包含抗原和/或致耐受性因子，其中通过使该免疫细胞通过缩窄部将该抗原和该致耐受性因子引入该免疫细胞，其中所述缩窄部使该细胞变形从而引起该细胞的扰动，这样使得该抗原和/或该致耐受性因子进入该免疫细胞。

本发明的某些方面提供了一种用于在个体中阻抑免疫应答的方法，该方法包括将免疫细胞引入该个体中，其中该免疫细胞包含抗原和/或致耐受性因子，其中通过使该免疫细胞通过缩窄部将该抗原和该致耐受性因子引入该免疫细胞，其中所述缩窄部使该细胞变形从而引起该细胞的扰动，这样使得该抗原和/或该致耐受性因子进入该免疫细胞。