[发明专利]移植用介质

说明书

根据本发明，通过在含有泊洛沙姆的医药上容许用作眼内灌注液或清洗液的介质中悬浮RPE细胞，可以实现：提高冷冻保存了的RPE细胞解冻后的生存率、改善在刚刚解冻后移植时的由RPE细胞带来的视细胞保护效果、防止从解冻至移植的各种工序中的RPE细胞的损失。

技术领域

本发明涉及视网膜色素上皮(RPE)细胞的悬浮化剂、悬浮于该悬浮化剂中的含有RPE细胞的组合物、包括将RPE细胞悬浮于该悬浮化剂中的操作的含有RPE细胞的组合物的制造方法等。

背景技术

视网膜色素上皮(RPE)细胞在视网膜的最外层作为伴随着色素的一层上皮细胞组织存在，对于维持掌管视觉的眼球视网膜的功能担负极为重要的作用。作为其代表性的功能，可以举出由吞噬功能造成的视网膜视细胞外节的新生、由特异性地存在于视细胞外节的作为感光蛋白的视物质的循环及各种细胞因子的分泌造成的作为RPE相邻组织的视细胞及血管膜的保护效果等。因而已知，RPE细胞因老化或其基因异常等而导致功能不全或与之相伴的变性甚至细胞死亡，由此引起老年性黄斑变性症(AMD)及Stargardt病等黄斑变性症或视网膜色素变性症(RP)等严重的视网膜变性。特别是，AMD是引起老年人的中心视力的降低、失明的眼病，在包括将要迎来空前的老龄化社会的日本在内的发达国家中成为重要的社会问题。现在，针对AMD的治疗方法一般是属于对症疗法的抗体药的眼内施用，还没有确立有效的治疗方法，因此希望开发出取代它的根治疗法。此外，对于Stargardt病及RP迄今为止还没有确立任何有效的治疗方法。

近年来，作为针对AMD、RP的新的治疗方法，补充或置换从多能干细胞分化诱导出的RPE细胞的细胞移植治疗引人关注，因此RPE细胞作为细胞治疗用移植材料的有效利用受到期待。例如，Ocata Therapeutics公司(原Advanced Cell Technology(ACT)公司)正在推进使用了人胚胎性干细胞(ES细胞)来源的RPE细胞的有关老年性黄斑变性症(AMD)及Stargardt病的临床研究(非专利文献1)。日本国也报告过，在2014年实施了将人工多能干细胞(iPS细胞)来源的RPE细胞膜片移植给渗出型AMD患者的手术，作为世界首例的iPS细胞移植治疗受到很大关注，现在治疗过程也很顺利。

现在，在RPE细胞的移植中，有(1)将所制备的RPE细胞膜片或向支架材料中接种RPE细胞而制备的带有支架的RPE细胞膜片从形成于视网膜中的切口移植到视网膜色素上皮的变性或缺损部位的方法；和(2)将RPE细胞悬浮液注入相同的部位的方法。由于移植用细胞的培养需要以GMP水平实施，因此在前者的情况下，要在RPE细胞膜片的制造后从细胞制备中心(CPC；Cell Processing Center)运送到进行移植手术的设施(医院)。另一方面，在后者的情况下，例如在Ocata Therapeutics公司的临床试验中，将CPC中制造并冷冻保存了的RPE细胞运送到医院，在医院中解冻，并在悬浮于移植用介质中后立即带入手术室而实施移植。从可以将细胞以冷冻状态从CPC运送到医院这一点考虑，认为后者的便利性更高。

然而，无法否定因实施冷冻-解冻处理而引起对移植细胞的损伤的可能性。以往，移植到局部的终末分化细胞、组织一般是通过生物体间移植、不包括冷冻工序的制造来提供。在不得已移植经过冷冻保存的细胞的情况下，担心因冷冻-解冻工序而造成细胞、组织的结构的损伤和功能降低。在实现局部的细胞移植治疗的方面，移植冷冻保存细胞的功能降低是大的课题，然而对于因移植刚刚解冻后的RPE细胞而造成的对治疗效果的影响，迄今为止没有进行过研究。

已知泊洛沙姆188(聚氧乙烯(160)聚氧丙烯(30)二醇)通过修复物理、化学地损伤了的细胞膜而显示出细胞保护效果，迄今为止，已经提出过若干有关肌营养不良症、心力衰竭、神经变性疾病、电损伤等疾病的治疗、移植等医疗应用中的作为细胞膜密封剂的泊洛沙姆188的使用的专利及专利申请(非专利文献2)。例如，Austen等人公开过将脂肪抽吸时损伤了的脂肪组织的细胞膜用泊洛沙姆188密封的方法(专利文献1)。他们还公开过通过将冷冻保存细胞在泊洛沙姆188的存在下解冻来提高冷冻保存细胞的生存率的方法(专利文献2)。