[发明专利]识别堆中的液滴的方法和相关联的测序仪

权利要求书

1.一种识别液滴流中各个液滴的内容物的方法，每个液滴都包含荧光团，其特征在于，包括以下步骤：将液滴逐个引入到至少一个开放式管中以在其中产生液滴堆；从所述管中依次释放所述液滴堆中的每个液滴，并在每个液滴出现时沿着所述管的主轴检测与每个液滴相关联的荧光。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，将所述液滴引入所述管的入口端并从出口端释放。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其特征在于，所述管竖直对齐，并且所述每个液滴经由所述出口从所述液滴堆的底部释放。

4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，所述液滴中的荧光团处于初始未发荧光状态，并且所述方法还包括在所述液滴位于所述液滴堆内的同时激活所述荧光团的步骤。

5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，所述荧光团与探针分子缔合，所述探针分子对用户希望识别的分析物分子具有选择性和特征性。

6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，包括基于检测到的荧光信号分选或表征所述液滴的额外步骤。

7.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，在所述管被从第一端填充液滴的同时，遍布所述管施加负压。

8.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，所述管的内直径小于所述液滴直径的两倍。

9.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，所述液滴堆中的液滴悬浮在不混溶的溶剂中。

10.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，所述管的内表面设有疏水和亲水涂层区域。

11.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述液滴的折射率在1.3至1.4的范围内，所述溶剂的折射率在1.3至1.7的范围内。

12.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，采用平行设置在基板中的管阵列，并在每个管中产生液滴堆。

13.根据权利要求12所述的方法，其特征在于，基板由具有在1.4至1.7的范围内的折射率的玻璃制成，所述玻璃可选地是吸光的。

14.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，包括用电磁辐射照射所述管并在每个液滴出现时检测由此产生的荧光辐射信号的步骤。

15.根据权利要求9至14中任一项所述的方法，其特征在于，选择水性液滴、溶剂和玻璃的折射率，以便建立引导模式，所述引导模式使由出现的液滴和所述堆中在该液滴后面的其他液滴产生的荧光信号之间发生小于10％的串扰。

16.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，来自被检测的液滴的电磁辐射的散射抑制由所述堆中在该被检测的液滴后面的液滴对电磁辐射的拾波，例如通过调谐所述管中的波导模式。

17.根据前述权利要求中任一项所述的方法，适于表征生物聚合物，其特征在于，包括以下步骤：

(1)逐步将所述生物聚合物消化成其构成单体的有序流；

(2)将单体的流转化为含单体的水性液滴的对应流，每个液滴另外包含探针，所述探针能够(a)捕获所述单体以及(b)此后被消化以释放捕获的单体的未猝灭的荧光团特征；

(3)将步骤(2)中产生的液滴的流引入到至少一个开放式管的入口端中，以在其中产生液滴堆；以及

(4)从所述管的出口端依次释放每个液滴并在每个液滴出现时检测每个液滴中的荧光团。