[发明专利]裸藻裂解物组合物以及用于生产所述组合物和纯化的β-1;3-葡聚糖的方法

说明书

一种组合物，包括裸藻裂解物以及细胞组分和从生产裸藻生物质和裸藻裂解物的发酵过程剩余的残余培养基。所述细胞组分可包括一条或多条具有1.2至580千道尔顿(kDa)分子量的β‑葡聚糖聚合物链。一种用于生产裸藻裂解物的方法，包括从裸藻属生物体生长生物质，将生物质裂解，并且将裂解的生物质干燥，形成裸藻裂解物。一种用于生产纯化的β‑1,3‑葡聚糖的方法，包括生长生物质，将其裂解，洗涤并脱水和干燥。

相关申请

这个PCT申请是基于2016年6月9日提交的美国申请系列No.15/177，368；和基于2016年6月9日提交的美国申请系列No.15/177,376；以及基于2016年6月9日提交的美国申请系列No.15/177,383；将这些申请的公开内容全部按引用并入。

技术领域

本发明涉及裸藻(Euglena)属生物体的领域，并且更特别地，本发明涉及裸藻裂解物组合物以及用于生产裸藻裂解物和生产纯化的β-1,3-葡聚糖的方法。

背景技术

β-葡聚糖是一组通过细菌、酵母、藻类、真菌以及在谷物中产生的β-D-葡萄糖多糖。β-葡聚糖的性质取决于来源，例如，是否来自细菌、藻类、酵母或其他来源。通常，β-葡聚糖用1,3β-糖苷键形成直链骨架。已知在人或动物膳食中掺入β-葡聚糖是有益的。一些β-葡聚糖可以帮助免疫调节以及降低饱和脂肪的水平和降低心脏病的风险。还已知不同类型的β-葡聚糖对人的生理学具有不同的作用。例如，谷物β-葡聚糖可以影响患有高胆固醇血的那些人的血糖调节，而蘑菇β-葡聚糖可以作为免疫系统的生物应答调节剂。在一些情况中，已经发现了酵母β-葡聚糖可以降低与过敏性鼻炎相关的IL4和IL5细胞因子的水平以及提高IL12的水平。

还已经确定了含有副淀粉(β-1,3-葡聚糖)的细小裸藻(Euglena gracilis)生物质可以增强个体的免疫功能。副淀粉是具有高分子量的直链(未分支的)β-1,3-葡聚糖多糖。这种未分支的聚合物不同于其他β-葡聚糖，如来自酵母细胞壁和谷物(例如，燕麦和大麦)的支链β-(1,3；1,6)-葡聚糖；以及用β-(1,4)-糖苷键形成多糖侧链的支链β-1,3-葡聚糖，如在蘑菇中发现的。

来自裸藻的β-葡聚糖的优点在于其缺乏β-(1,6)、β-(1,4)和β-(1,2)键以及任何侧分支结构。作为分子并且与具有分支的一些其他葡聚糖相似，这种直链β-葡聚糖是不溶的，并且认为是同质的，并且对于免疫应答中涉及的受体具有更高的组合定位和结合亲和性。副淀粉可以获自细小裸藻藻类，细小裸藻是原生生物体，并且是裸藻科(euglenales)内的微藻分类裸藻(euglenophyceae)的成员并且包括许多不同的自养和异养物种，这些物种也可以产生副淀粉。这些原生生物可以在富营养的淡水中找到，如浅水河流、湖泊和池塘。副淀粉是用于裸藻类(Euglenoid)的能量储存化合物并且与其他藻类中的淀粉或油和脂肪相当。副淀粉在淀粉核中产生并作为颗粒储存在细胞质中。细小裸藻中的副淀粉颗粒是椭圆形的并且直径约为0.5-2微米(um)。细小裸藻的原种通常维持在受控的实验室条件下并且用作初始接种源。细小裸藻可以在密闭的、可灭菌的生物反应器中无外来污染地(axenically)生产。可以将细小裸藻接种物转移至种子生物反应器中，以累积较大量的生物质，并且随后按照需要传送至较大的生物反应器中。

理想的是使用改进的发酵技术，从裸藻属生物体，并且更特别地，从细小裸藻，扩大生产这种直链、未分支的β-1,3-葡聚糖。细小裸藻衍生的β-葡聚糖对于人和其他动物健康可以给予有利特性，包括增强的免疫应答和其他促进健康的性质。理想的是形成对于提高的免疫调节和其他用途具有增强性质的β-葡聚糖组合物。

发明内容

提供这个概述来介绍以下在详述中进一步描述的概念的选择。这个概述不是打算来鉴定所要求主题的关键或必要特征，也不是打算用作限制所要求主题的范围的辅助。