[发明专利]罗汉果醇或罗汉果醇糖苷的生产方法有效
| 申请号： | 201780044407.6 | 申请日： | 2017-07-18 |
| 公开（公告）号： | CN109477126B | 公开（公告）日： | 2023-06-20 |
| 发明（设计）人： | 落合美佐;小埜栄一郎 | 申请（专利权）人： | 三得利控股株式会社 |
| 主分类号： | C12P19/14 | 分类号： | C12P19/14;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;C12N15/09;C12P19/44;C12P19/56;C12N9/24 |
| 代理公司： | 北京信慧永光知识产权代理有限责任公司 11290 | 代理人： | 洪俊梅;张淑珍 |
| 地址： | 日本*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 罗汉果 糖苷 生产 方法 | ||
1.一种罗汉果醇及/或罗汉果醇糖苷的制造方法，其特征在于，包括使由序列号2的氨基酸序列构成的蛋白质与具有至少一个葡糖苷键的罗汉果醇糖苷反应，从而将罗汉果醇糖苷的至少一个葡糖苷键水解的工序，
所述至少一个葡糖苷键为附加于罗汉果醇3位的龙胆二糖的β-1，6-葡糖苷键、附加于罗汉果醇3位的葡萄糖与作为糖苷配基的罗汉果醇之间的葡糖苷键、附加于罗汉果醇24位的支链三糖的β-1，6-葡糖苷键、附加于罗汉果醇24位的龙胆二糖的β-1，6-葡糖苷键及/或附加于罗汉果醇24位的葡萄糖与作为糖苷配基的罗汉果醇之间的葡糖苷键。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在权利要求1的制造方法中，与蛋白质反应的罗汉果醇糖苷选自罗汉果皂苷V、罗汉果皂苷IV、赛门苷I、11-氧代罗汉果皂苷、罗汉果皂苷I、罗汉果皂苷IVA、罗汉果皂苷III、罗汉果皂苷IIIA1、罗汉果皂苷IIIA2、罗汉果皂苷IIIE、罗汉果皂苷IIA1、罗汉果皂苷II A2、罗汉果皂苷IIE、罗汉果皂苷IA1、罗汉果皂苷IE1中的至少一种。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述罗汉果醇糖苷选自罗汉果皂苷V、罗汉果皂苷IIIE、赛门苷I中的至少一种。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述罗汉果醇糖苷为罗汉果皂苷V。
5.一种罗汉果醇及/或罗汉果醇糖苷的制造方法，其特征在于，包括使来自在宿主细胞中导入了选自以下(a)～(b)中的多核苷酸的非人转化细胞的酶剂与具有至少一个葡糖苷键的罗汉果醇糖苷接触，将所述罗汉果醇糖苷的至少1个葡糖苷键水解的工序：
(a)由序列号1的碱基序列构成的多核苷酸；
(b)编码由序列号2的氨基酸序列构成的蛋白质的多核苷酸，
所述至少一个葡糖苷键为附加于罗汉果醇3位的龙胆二糖的β-1，6-葡糖苷键、附加于罗汉果醇3位的葡萄糖与作为糖苷配基的罗汉果醇之间的葡糖苷键、附加于罗汉果醇24位的支链三糖的β-1，6-葡糖苷键、附加于罗汉果醇24位的龙胆二糖的β-1，6-葡糖苷键及/或附加于罗汉果醇24位的葡萄糖与作为糖苷配基的罗汉果醇之间的葡糖苷键。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述多核苷酸插入在表达载体中。
7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述转化细胞为转化曲菌、转化酵母、转化细菌或转化植物。
8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述转化细胞为转化曲菌、转化酵母、转化细菌或转化植物。
9.根据权利要求5～8中任一项所述的方法，其特征在于，与所述酶剂接触的罗汉果醇糖苷选自罗汉果皂苷V、罗汉果皂苷IV、赛门苷I、11-氧代罗汉果皂苷、罗汉果皂苷I、罗汉果皂苷IVA、罗汉果皂苷III、罗汉果皂苷IIIA1、罗汉果皂苷IIIA2、罗汉果皂苷IIIE、罗汉果皂苷IIA1、罗汉果皂苷IIA2、罗汉果皂苷IIE、罗汉果皂苷IA1、罗汉果皂苷IE1中的至少一种。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述罗汉果醇糖苷选自罗汉果皂苷V、罗汉果皂苷IIIE、赛门苷I中的至少一种。
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