[发明专利]用于在植物中进行基因表达的方法和组合物

说明书

本发明提供了用于在转基因植物中提供有效的蛋白质表达的重组DNA分子，以及使用所述重组DNA分子的组合物和方法。在特定实施方案中，本发明提供了包含编码转运肽的序列和赋予除草剂耐受性的可操作连接序列的重组DNA分子和构建体。

相关申请案的引用

本申请案要求2016年7月29日提交的美国临时申请案第62/368,840号的权益，该临时申请案通过引用整体并入本文。

序列表的并入

计算机可读形式的序列表通过电子提交与本申请一起提交，并且通过引用整体并入本申请中。序列表包含在名为MONS397WO_ST25的文件中，该文件大小为330千字节(在MSWindows操作系统中测量)，创建于2017年7月26日。

发明背景

技术领域

本发明总体涉及农业、植物生物技术和分子生物学领域。更具体地，本发明涉及用于在转基因植物中进行重组蛋白表达的组合物及其使用方法。

相关技术的描述

农作物生产通常利用具有经修饰的基因组，包括使用分子生物学方法产生的转基因性状的作物。例如，可以将异源基因(也称为转基因)引入植物基因组中。转基因在植物中的表达赋予植物诸如除草剂耐受性或昆虫防治的性状。通过利用异源基因表达元件可以实现转基因在植物中的成功表达。这方面的一个实例是使用与重组蛋白可操作地连接的转运肽，以实现重组蛋白的亚细胞定位，从而增强蛋白质表达或功能。因此需要能够在植物细胞内有效定位重组蛋白的新型转运肽。

发明内容

一方面，本发明提供了一种重组DNA分子，其包含编码转运肽的DNA序列，所述转运肽与编码异源除草剂耐受性蛋白的DNA序列可操作地连接，其中所述转运肽包含与选自SEQID NO:4-49和SEQ ID NO:236-266的序列含至少97％同一性的氨基酸序列。在一个实施方案中，所述异源除草剂耐受性蛋白具有除草剂不敏感的原卟啉原氧化酶活性。在另一个实施方案中，所述异源除草剂耐受性蛋白包含与选自SEQ ID NO:100-119、SEQ ID NO:163-182和SEQ ID NO:224-228的序列含至少97％同一性的氨基酸序列。再一个实施方案中，编码转运肽的所述DNA序列包含与选自SEQ ID NO:54-99和SEQ ID NO:267-297的序列含至少97％同一性的核酸序列。还有另一个实施方案中，编码异源除草剂耐受性蛋白的所述DNA序列包含与选自SEQ ID NO:121-162和SEQ ID NO:183-223、SEQ ID NO:229-235的序列含至少97％同一性的核酸序列。再另一个实施方案中，所述重组DNA分子还包含与编码转运肽的所述DNA序列可操作地连接的异源启动子。

另一方面，本发明提供了一种DNA构建体，其包含本文提供的DNA分子，诸如包含编码转运肽的DNA序列的重组DNA分子，所述转运肽与编码异源除草剂耐受性蛋白的DNA序列可操作地连接，其中所述转运肽包含与选自SEQ ID NO:4-49和SEQ ID NO:236-266的序列含至少97％同一性，与异源启动子可操作地连接的氨基酸序列。在一个实施方案中，所述异源除草剂耐受性蛋白具有除草剂不敏感的原卟啉原氧化酶活性。在另一个实施方案中，所述异源除草剂耐受性蛋白包含选自SEQ ID NO:100-119、SEQ ID NO:163-182和SEQ ID NO:224-228的氨基酸序列。再另一个实施方案中，所述DNA构建体存在于转基因植物、种子或细胞的基因组中。