[发明专利]侧流装置及使用方法

说明书

提供了用于进行侧流Western印迹试验的侧流装置，方法和试剂盒。侧流装置包括：由多孔材料构成的芯吸垫，所述芯吸垫具有用于施加包含固定的分析物的基材的区域，其中，所述芯吸垫具有第一端、第二端和两个侧边；第一储器，其包括位于芯吸垫的第一端上的多个试剂层的堆叠；第二储器，其包括位于芯吸垫的第二端上的吸收垫。

本申请要求2016年7月25日提交的美国临时申请62/366,496的权益，该申请通过引用整体并入本文。

背景

生物科学中经常使用检测固定的分析物的方法。例如，常规印迹(例如，Southern、Northern、Western、Far Western、Eastern、真空、Middle Eastern、 Eastern-Western和Far-Eastern印迹等)可用于检测固定在基材或膜上或基质中(例如，在琼脂糖或丙烯酰胺中)的分析物。一般而言，这类印迹技术涉及固定待检测的分析物和使分析物接触结合试剂(例如，抗体)。印迹也通常在固定和最终检测之间包括多个洗涤步骤和/或封闭步骤。这类洗涤和封闭步骤消耗了实施者有限的时间和/或试剂，并且可以是误差和不可再现性的来源。

发明内容

本文提供了侧流装置及使用方法。

在一个实施方式中，所述装置包括：由多孔材料构成的芯吸垫，所述芯吸垫具有用于施加包含固定的分析物(例如蛋白质)的基材的区域，其中，所述芯吸垫具有第一端、第二端和两个侧边；第一储器，其包括位于芯吸垫的第一端上的多个试剂层的堆叠；第二储器，其包括位于芯吸垫的第二端上的吸收垫。在一些实施方式中，多个试剂层中的每一层包含固定在吸收垫中的试剂。在一些实施方式中，每个试剂层包括涂覆或结合在一部分下表面上的薄阻挡层。在某些实施方式中，多个试剂层中的每一层包含在溶液中的试剂。在某些实施方式中，多个试剂层中的每一层包含密度剂。在一些实施方式中，密度剂选自下组：甘油、蔗糖、海藻糖、葡聚糖和聚乙二醇。在某些实施方式中，多个试剂层中的每一层在其中具有不同的试剂。

在多个试剂层中的每一层包含在溶液中的试剂的一些实施方式中，第一储器是圆筒或槽，其在第一端具有流体流量控制器以控制溶液从第一储器释放。在某些实施方式中，流体流量控制器是阀。在一些实施方式中，流体流量控制器是宽度在约0.5mm至约2mm范围内的狭缝。在一些实施方式中，狭缝的宽度为约0.5mm或约1mm。

在某些实施方式中，试剂层中的试剂选自下组：一抗、二抗、第一洗涤溶液和第二洗涤溶液。在一些实施方式中，多个试剂层从与芯吸垫接触的试剂层开始，包含具有一抗的第一试剂层、具有第一洗涤溶液的第二试剂层、具有二抗的第三试剂层和具有第二洗涤溶液的第四试剂层。在一些实施方式中，多个试剂层从第一储器的第一端处或附近的试剂层开始，包含具有一抗的第一试剂层、具有第一洗涤溶液的第二试剂层、具有二抗的第三试剂层和具有第二洗涤溶液的第四试剂层。在某些实施方式中，第四试剂层的厚度是第三试剂层的至少两倍。在一些实施方式中，第一储器具有包含第二洗涤溶液的第五试剂层。在某些实施方式中，第一储器中第二洗涤溶液的体积至少是二抗体积的两倍。

在多个试剂层中的每一层由吸收垫形成的实施方式中，第一试剂层的至少一部分与芯吸垫紧密接触。

在具有吸收试剂层的一些实施方式中，该装置密封在塑料外壳中。在一些实施方式中，塑料外壳包括模制的底部部分和密封于底部部分的平面盖子。在一些实施方式中，芯吸垫和储器是干燥的。在一些实施方式中，芯吸垫和第一储器中的至少一个是湿的。