[发明专利]通过压滤和在陶瓷膜上的切向流过滤分离酶与里氏木霉

权利要求书

1.一种将来自培养基的酶混合物与霉菌里氏木霉分离的方法，该培养基获自由霉菌生产酶，在该方法中：

-从停止生产开始，在小于或等于30小时的时间段内在内衬有孔隙尺寸为3-20μm的织物的压滤机上对所述培养基施以分离，从而获得具有在600nm下小于2.5的经校准的光密度OD的滤液；和

-在具有0.5至1.4μm的截留阈值的陶瓷膜上对所获得的液相施以切向流微量过滤，从而经校准的OD 600nm不超过0.1。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述时间段小于或等于24小时。

3.如权利要求1或2所述的方法，其中在没有预先冷却的情况下在压滤机上对所述培养基施以分离。

4.如权利要求1或2所述的方法，其中在压滤机上分离结束时，获得5-10重量％滤饼和90-95重量％的滤液。

5.如权利要求1或2所述的方法，其中获自压滤机的滤液的丸粒率小于1.5％，所述丸粒率是指固体所占体积相对于样品总体积的百分比，其通过以4000G离心样品5分钟测得。

6.如权利要求1或2所述的方法，其中以最多10重量％的比例将滤液再循环至为压滤机供料的培养基中。

7.如权利要求1或2所述的方法，其中在压滤结束时获得的滤液的微量过滤在最多30小时的时间段内进行。

8.如权利要求7所述的方法，其中在压滤结束时获得的滤液的微量过滤在最多24小时的时间段内进行。

9.如权利要求1或2所述的方法，其中在没有预先冷却的情况下对所述获自压滤机的滤液施以微量过滤。

10.如权利要求1或2所述的方法，其中在压滤机上的分离以及微量过滤在20-30℃下进行。

11.如权利要求10所述的方法，其中在压滤机上的分离以及微量过滤在22-27℃下进行。

12.如权利要求1或2所述的方法，其中切向流微量过滤在具有0.8至1.4μm的截留阈值的陶瓷膜上进行。

13.如权利要求1或2所述的方法，其中在压滤机上分离之前不对所述培养基施以滗析和/或离心。

14.如权利要求1或2所述的方法，其中微量过滤在陶瓷膜上进行。

15.如权利要求1或2所述的方法，其中在具有5至15kDa的截留阈值的陶瓷膜上对在微量过滤之后获得的液相施以超滤。

16.如权利要求1或2所述的方法，其中对在微量过滤之后获得的液相施以超滤最多48小时的时间段。

17.如权利要求1或2所述的方法，其中对在微量过滤之后获得的液相施以超滤最多24小时的时间段。

18.如前权利要求1或2所述的方法，其中使经分离的酶混合物与已经预处理的木质纤维素生物质接触，从而进行酶水解并获得糖汁，所述糖汁经历乙醇发酵，所述酶水解和发酵独立地或同时地进行，并且产生的乙醇通过蒸馏分离。

19.如前权利要求18所述的方法，其中使经分离的酶混合物与已经通过蒸汽爆破预处理的木质纤维素生物质接触。