[发明专利]含有生物粒子的试样的预处理方法、生物粒子的图像取得方法、含有生物粒子的试样的预处理装置、及生物粒子图像取得装置

说明书

一种含有生物粒子的试样的预处理方法，其包括：对含有作为检测对象的生物粒子的试样进行筛分，取得从网孔250～1000μm的筛网(A)通过，并且不从网孔32～63μm的筛网(B)通过的级分(1b)的工序；以及向所述级分(1b)中添加具有1.10～2.45g/cm³的密度的胶体溶液，进行离心分离而取得离心分离后的上清级分(S0)的工序。

技术领域

本发明涉及一种含有生物粒子的试样的预处理方法、生物粒子的图像取得方法、含有生物粒子的试样的预处理装置、及生物粒子的图像取得装置。

本申请基于2016年11月30日于日本提出申请的日本特愿2016-232868号而主张优先权，在此援引其内容。

背景技术

小型底栖生物(meiofauna)是指，从网孔1mm的筛网通过，可被网孔32μm的筛网捕捉的生物的统称。已知小型底栖生物会对物质循环、堆积物的稳定造成显著的影响，是深海生态系统的重要构成要素。此外，因传代时间短，对环境的变化迅速反应，而易于检测环境的变化。进而，小型底栖生物即使在生物的栖息密度低的深海底，栖息密度也高，也易于定量采集，因此容易统计解析。基于这些原因，小型底栖生物作为深海底的环境影响评价的对象生物而被重视。

以往，小型底栖生物的种类的判别以及计数是利用显微镜观察来进行的，而需要精细的作业。因此，为了处理一件样品而需要大量的时间。在进行环境影响评价的情况下，需要处理大量的样品，因此有时为了处理所有的样品也会花费几年以上。此外，对于由显微镜观察实现的解析而言，需要专业性知识和技巧性，也难以稳定地确保这样的人材。进而，对于由显微镜观察实现的解析而言，也有根据观察者而在解析结果出现偏差的可能性。

另一方面，作为用于解析流体中的粒子的装置，例如提出了在专利文献1中记载的装置。在专利文献1中记载的装置具备流体稀释系统和粒子成像系统，在样品流体不透明或者具有粘性的情况下，利用流体稀释系统来进行样品流体的稀释。在由粒子成像系统取得的图像不清楚的情况下，控制流体稀释系统以使其工作。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：美国专利申请公开第2014/0146157号说明书

发明内容

发明所要解决的问题

对于专利文献1中记载的装置而言，在由粒子成像系统取得的图像不清楚的情况下，流体稀释系统进行工作，因此导致流体稀释系统进行工作之前的样品流体白白浪费。此外，在以小型底栖生物这样的栖息于堆积物中的生物为对象的情况下，在从海底等采取的样品中，堆积物粒子相对于作为对象的生物粒子而言压倒性地大量存在。因此，仅仅通过稀释难以观察作为对象的生物粒子。进而，若含有大量堆积物粒子的样品流入粒子成像系统所使用的流动池，则也会有堆积物粒子堵塞流动池流路的问题。另一方面，若试图将样品稀释至堆积物粒子不会造成流动池的网眼堵塞的程度，则会使投入流动池的样品量变得庞大而并不实际。

因此，本发明的问题在于，提供一种即使在堆积物粒子存在的情况下，也能迅速地进行生物粒子的解析的技术。

用于解决问题的方案

本发明的一个方案为含有生物粒子的试样的预处理方法，其包括：对含有作为检测对象的生物粒子的试样进行筛分，取得从网孔250～1000μm的筛网(A)通过，并且不从网孔32～63μm的筛网(B)通过的级分(1b)的工序；以及向所述级分(1b)中添加具有1.10～2.45g/cm³的密度的胶体溶液，进行离心分离而取得离心分离后的上清级分(S0)的工序。