[发明专利]载体介导的眼睛免疫耐受性

说明书

本发明涉及用于将人白细胞抗原G递送至眼睛和/或角膜外植体的载体，以及使用该载体治疗和/或预防角膜移植排斥和与免疫反应和/或血管形成相关的其他病症的方法。

优先权声明

本申请要求2016年7月26日提交的美国临时申请序列号62/366,822的权益，其全部内容通过引用并入本文。

政府支持声明

本发明是在国立卫生研究院给予的批准号AI072176和AR064369的政府支持下完成的。政府对本发明享有一定的权利。

技术领域

本发明涉及用于将人白细胞抗原G(HLA-G)递送至眼睛和/或角膜外植体的载体，以及使用该载体治疗和/或预防角膜移植排斥和与免疫反应和/或血管形成相关的其他病症的方法。

背景技术

治疗视力丧失进行的角膜植入是全世界最常见的组织移植形式，仅在美国就有大约47,000例。在低风险患者中，术后两年的移植排斥率约为15％，其成功主要归因于相对健康的角膜中没有血管形成。相比之下，高风险角膜移植在仅两年后就出现惊人的50-70％排斥率，并且许多患有严重角膜疾病的患者不建议进行该手术。这些高风险病例被定义为具有显著量的预先存在的角膜血管形成和/或具有先前植入。目前的治疗依赖于局部和全身皮质类固醇，其表现出较低的成功率和严重的不良副作用。

眼睛公认地是免疫特权部位，所指的部位就包括角膜。角膜的免疫特权状态由几种机制维持，包括血-眼屏障，没有角膜淋巴管和脉管系统，角膜细胞上Fas配体的表达，角膜细胞上主要组织相容性复合物(MHC)I类和II类分子的低表达，角膜中央的成熟抗原呈递细胞(APC)很少，房水和泪膜中具有免疫调节因子(如α黑素细胞刺激素和转化生长因子β)，以及前房相关免疫偏离现象。当失去角膜免疫特权的任何部分时，角膜移植物被认为具有高排斥风险，可能出现眼部炎症、感染、创伤和随后的血管化。

角膜移植物排斥在手术后数周内发生，并且临床表现为上皮或内皮排斥线、基质排斥带、角膜厚度增加和前段炎症(角膜后沉着物、房水闪光和细胞)。出现这种急性移植物排斥时，宿主受体T细胞能直接识别出供体APC表面上的供体MHC分子(I类和II类)，导致快速的效应物炎症，这已被称为移植物排斥的直接途径。随着移植后的时间的延长以及供体APC迁移出供体组织，将不太可能再发展出这种类型的排斥。但是，长期来讲，当供体MHC分子被受体MHC分子吸收并由受体MHC分子呈递给受体T细胞时，引发传入免疫应答，也会发生移植失败，这被称为移植物排斥的间接途径。因此，在角膜移植物排斥中MHC同种异体抗原的受体T细胞识别起着重要作用。

宿主细胞毒性T细胞(CD8⁺)识别供体I类抗原(上皮、基质和内皮细胞的HLA-A、B、C)，辅助性T细胞(CD4⁺)识别由APC呈递的供体II类抗原(例如，淋巴细胞、巨噬细胞、朗格汉斯细胞和间质树突细胞)，当它们被激活时上调趋化因子、细胞因子(IL-2、IFN-γ、巨噬细胞活化因子、迁移抑制因子)和毒性分子(包括一氧化氮、超氧化物自由基和肿瘤坏死因子α)，其中每一种都会损伤角膜同种异体移植物。这些细胞因子和趋化因子通过进一步表达II类抗原加强了炎症。细胞毒性T淋巴细胞(CTL)是直接攻击携带外来抗原细胞的主要效应细胞。除了适应性免疫应答之外，先天免疫应答的NK细胞和巨噬细胞也可能在角膜移植物排斥中起作用。角膜移植物的长期存活依赖于CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺调节性T细胞的发育，其对Foxp3⁺具有高表达并且能有效抑制T细胞增殖。