[发明专利]将血液重编程成诱导多能干细胞的新型且有效的方法

权利要求书

1.一种产生血细胞来源的诱导多能干细胞的方法，所述方法包括：

提供一定量的血细胞；

向所述血细胞中递送一定量的重编程因子；以及

在重编程培养基中培养所述血细胞至少4天，其中，递送所述重编程因子以及在重编程培养基中进行培养产生血细胞来源的诱导多能干细胞。

2.如权利要求1所述的方法，其中，递送一定量的重编程因子包括核转染。

3.如权利要求1所述的方法，其中，所述重编程因子包括选自于由以下因子所组成的组中的一种或多种因子：

Oct-4、Sox-2、Klf-4、c-Myc、Lin-28、SV40大T抗原(“SV40LT”)以及靶向p53的短发夹RNA(“shRNA-p53”)。

4.如权利要求3所述的方法，其中，所述重编程因子在一个或多个oriP/EBNA1派生的载体中编码。

5.如权利要求4所述的方法，其中，所述一个或多个oriP/EBNA1派生的载体包括pEP4E02S ET2K、pCXLE-hOCT3/4-shp53-F、pCXLE-hSK、pCXLE-hUL和pCXWB-EBNA1。

6.如权利要求1所述的方法，所述方法包括在将重编程因子递送至所述血细胞中之后，将所述血细胞铺在经处理的细胞培养表面上，并在所述经处理的细胞培养表面上在重编程培养基中对所述血细胞进行培养。

7.如权利要求6所述的方法，其中，所述经处理的细胞培养表面包含铺放的小鼠胚胎饲养层(MEF)。

8.如权利要求6所述的方法，其中，所述经处理的细胞培养表面包含细胞外基质蛋白。

9.如权利要求8所述的方法，其中，所述细胞外基质蛋白包括层粘连蛋白。

10.如权利要求9所述的方法，其中，所述层粘连蛋白包括L-521。

11.如权利要求1所述的方法，其中，所述重编程培养基包括胚胎干细胞(ESC)培养基。

12.如权利要求11所述的方法，其中，所述ESC培养基包含碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)。

13.如权利要求1所述的方法，其中，所述重编程培养基包括E7培养基。

14.如权利要求13所述的方法，其中，所述重编程培养基包括E7培养基，所述E7培养基包含L-抗坏血酸、转铁蛋白、碳酸氢钠、胰岛素、亚硒酸钠和/或bFGF。

15.如权利要求1所述的方法，其中，在重编程培养基中培养所述血细胞至少4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天、14天、15天或16天。

16.如权利要求1所述的方法，其中，在重编程培养基中培养所述血细胞至少17天、18天、19天、20天、21天、22天、23天、24天、25天、26天、27天、28天、29天、30天或31天。

17.包含由如权利要求1所述的方法产生的血细胞来源的诱导多能干细胞的细胞系。

18.如权利要求1所述的方法，其中，所述血细胞从具有疾病突变的受试者分离。

19.如权利要求18所述的方法，其中，所述疾病突变与神经退行性疾病、病症和/或状况相关。

20.如权利要求18所述的方法，其中，所述疾病突变与炎性肠疾病、病症和/或状况相关。