[发明专利]用于亲和色谱的碱性稳定性FC结合蛋白

权利要求书

1.一种包含一个或多个结构域的Fc结合蛋白，其中至少一个结构域包含选自SEQ IDNO:1-6或21中的任一个的氨基酸序列。

2.权利要求1的Fc结合蛋白，其中所述蛋白质包含2、3、4、5或6个彼此连接的结构域。

3.权利要求2的Fc结合蛋白，其中所有所述结构域选自SEQ ID NO:1-6或21中的任一个。

4.权利要求2的Fc结合蛋白，其中所述结构域是SEQ ID NO1-6或21的衍生物，并且另外地其中每个衍生物具有这样的氨基酸序列，所述氨基酸序列除了在其N-末端的前4个氨基酸内具有1、2或3个氨基酸的缺失和/或在其C-末端的前2个氨基酸内具有1或2个氨基酸的缺失外，与SEQ ID NO:1-6或21之一100％相同。

5.权利要求2的Fc结合蛋白，其中所述蛋白质是同多聚体。

6.权利要求2的Fc结合蛋白，其中所述蛋白质是异多聚体。

7.权利要求2-4中任一项的Fc结合蛋白，其中一个或多个结构域直接彼此连接或通过一个或多个接头彼此连接。

8.权利要求7的Fc结合蛋白，其中所述接头是肽接头。

9.权利要求1-8中任一项的Fc结合蛋白，其中所述蛋白在0.5MNaOH中孵育至少5小时后具有小于15％的结合能力降低。

10.权利要求1-9中任一项的Fc结合蛋白，其中将所述Fc结合蛋白与固体支持物缀合。

11.前述权利要求中任一项的Fc结合蛋白，其中所述Fc结合蛋白还包含用于所述Fc结合蛋白与固体支持物的位点特异性共价偶联的附接位点。

12.一种亲和分离基质，其包含权利要求1-11中任一项的Fc结合蛋白。

13.权利要求1-11中任一项的Fc结合蛋白或权利要求12的亲和分离基质用于包含Fc序列的任何蛋白的亲和纯化的用途。

14.权利要求13的用途，其中在pH3.5或更高的pH下，所述包含Fc序列的蛋白质的洗脱大于或等于95％。

15.一种用于亲和纯化包含Fc序列的蛋白质的方法，所述方法包括：

(a)提供含有包含Fc序列的蛋白质的溶液；

(b)提供亲和分离基质，其包含至少一种与其偶联的权利要求1-7中任一项的Fc结合蛋白；

(c)在允许权利要求1-7中任一项的所述至少一种Fc结合蛋白与包含Fc序列的蛋白质特异性结合的条件下，使所述亲和分离基质与所述溶液接触；以及

(d)从所述亲和纯化基质中洗脱包含Fc序列的所述蛋白质。

16.权利要求15的方法，其还包括在步骤(c)或(d)之间洗涤所述亲和基质。

17.权利要求15的方法，其还包括在步骤(c)或(d)之间洗涤亲和基质。

18.权利要求15-17中任一项的方法，其中所述包含Fc序列的蛋白质包含免疫球蛋白分子或其片段或衍生物。

19.权利要求15-18中任一项的方法，其中在pH3.5或更高的pH下，所述包含Fc序列的蛋白质的洗脱大于或等于95％。

20.一种用于亲和纯化包含Fc序列的蛋白质的方法，所述方法包括：

(a)使包含与其偶联的权利要求1-7中任一项的至少一种Fc结合蛋白的亲和分离基质与含有包含Fc序列的蛋白质的溶液在允许所述至少一种Fc结合蛋白与所述包含Fc序列的蛋白质结合的条件下接触；和

(b)从所述亲和纯化基质中洗脱所述包含Fc序列的结合蛋白。