[发明专利]鉴定肽表位的方法、结合此类表位的分子和相关用途

权利要求书

1.一种鉴定肽表位的方法，其包括：

a)在体外向细胞中引入包含编码靶抗原的异源核酸的重组巨细胞病毒CMV载体颗粒，其中所述CMV载体颗粒不表达活性UL128和/或UL130蛋白或其直系同源物，并且其中该UL128和/或UL130缺陷的CMV载体产生T细胞应答，所述T细胞应答的特征在于产生通用的、超表位的和/或非常规的肽表位；并且

b)在引入后，检测或鉴定在该细胞的表面上的在MHC分子的背景下的一种或多种肽，其中在MHC分子的背景下的该一种或多种肽包含该靶抗原的肽表位。

2.权利要求1的方法，其还包括在该细胞上鉴定与在MHC分子的背景下的该一种或多种肽中的至少一种结合的肽结合分子或其抗原结合片段。

3.权利要求1或2的方法，其中该CMV载体颗粒在编码UL128和/或UL130的开放阅读框或编码UL128和/或UL130的直系同源物的开放阅读框中被改变。

4.权利要求1或2的方法，其中该CMV载体颗粒在编码UL128和/或UL130或其直系同源物的开放阅读框中包含点突变、移码突变或缺失。

5.权利要求1或2的方法，其中该CMV载体颗粒是哺乳动物CMV载体颗粒。

6.权利要求1或2的方法，其中该CMV载体颗粒是灵长类动物或人CMV载体颗粒。

7.权利要求1或2的方法，其中该CMV载体颗粒是恒河猴CMV载体颗粒。

8.权利要求7的方法，其中该CMV载体颗粒是RhCMV 68-1。

9.权利要求1或2的方法，其中该CMV载体颗粒包含与亲本CMV基因组相比在编码UL128和/或UL130的开放阅读框中已经被修饰的基因组。

10.权利要求9的方法，其中与亲本CMV基因组相比，编码UL128和/或UL130的开放阅读框的全部或功能活性部分被缺失。

11.权利要求9的方法，其中该亲本CMV基因组是选自AD169、Davis、Toledo、Towne或Merlin、其感染性细菌人工染色体BAC或临床分离株的人CMV基因组。

12.权利要求1或2的方法，其中该CMV载体颗粒不表达活性UL11蛋白或UL11蛋白的直系同源物，或者在编码UL11或UL11的直系同源物的开放阅读框中被改变。

13.权利要求1或2的方法，其中该MHC分子是MHCIa类、MHCII类或MHC-E分子。

14.权利要求1或2的方法，其中该细胞是原代细胞或是细胞系。

15.权利要求1或2的方法，其中该细胞能够被该CMV载体颗粒感染。

16.权利要求1或2的方法，其中该细胞选自成纤维细胞、内皮细胞、B细胞、树突细胞、巨噬细胞和人工抗原呈递细胞。

17.权利要求16的方法，其中该成纤维细胞是细胞系或原代成纤维细胞。

18.权利要求1或2的方法，其中该细胞是人细胞。

19.权利要求1或2的方法，其中该MHC分子是人的。