[发明专利]配体偶联的量子点纳米颗粒和使用它们检测DNA甲基化的方法

权利要求书

1.一种纳米颗粒偶联物，其特征在于纳米颗粒与DNA甲基化特异性结合配体连接。

2.根据权利要求1所述的纳米颗粒偶联物，其特征在于所述纳米颗粒通过酰胺键与DNA甲基化特异性结合配体共价连接。

3.一种纳米颗粒偶联物，其特征在于所述纳米颗粒是包含核半导体材料和外层的量子点，

其中所述外层包含与甲基化特异性结合配体连接的官能化有机涂层。

4.根据权利要求3所述的配体纳米颗粒偶联物，其特征在于所述甲基化特异性结合配体与5-甲基胞嘧啶和/或5-羟甲基胞嘧啶特异性结合。

5.根据权利要求4所述的配体纳米颗粒偶联物，其特征在于所述甲基化特异性结合配体选自抗5-甲基胞嘧啶抗体、抗5-羟甲基胞嘧啶抗体、抗5-甲酰基胞嘧啶抗体、抗5-羧基胞嘧啶抗体、抗-N6-甲基腺嘌呤抗体及其任何组合。

6.根据权利要求5所述的配体纳米颗粒偶联物，其特征在于所述甲基化特异性结合配体是抗5-甲基胞嘧啶抗体。

7.根据权利要求6所述的配体纳米颗粒偶联物，其特征在于所述纳米颗粒包含II-VI族材料、III-V族材料，或I-III-VI族材料，或其任何合金。

8.根据权利要求7所述的配体纳米颗粒偶联物，其特征在于还包含细胞摄取增强剂、组织渗透增强剂，或其组合。

9.一种制备配体纳米颗粒偶联物的方法，其特征在于包括将纳米颗粒与DNA甲基化特异性结合配体偶联，其中所述纳米颗粒包含含有核半导体材料的量子点和外层，其中所述外层包含羧基。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于还包括纯化所述DNA甲基化特异性结合配体纳米颗粒偶联物。

11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于还包括分离所述DNA甲基化特异性结合配体纳米颗粒偶联物。

12.根据权利要求11所述的方法，其特征在于所述偶联步骤在偶联剂存在下进行。

13.根据权利要求12所述的方法，其特征在于所述偶联剂是1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐。

14.一种DNA甲基化的检测方法，包括

i)使权利要求1所述的配体-纳米颗粒偶联物与甲基化DNA区域接触；

ii)用光源激发所述配体-纳米颗粒偶联物；和

iii)检测所述配体-纳米颗粒偶联物的光发射或光吸收。

15.根据权利要求14所述的方法，其特征在于所述样品是固定的组织样品或在细胞培养物中培养的活细胞中的样品。

16.根据权利要求15所述的方法，其特征在于所述检测是实时执行的。

17.根据权利要求16所述的方法，其特征在于所述检测信号被放大。

18.根据权利要求1所述的配体纳米颗粒偶联物作为免疫测定试剂的用途，用于DNA样品的甲基化区域的检测。

19.根据权利要求18所述的用途，其特征在于所述样品是固定的组织样品或在细胞培养物中培养的活细胞中的样品。

20.根据权利要求18所述的用途，其特征在于所述检测是实时进行的。