[发明专利]MCM7获得抗乙酸酵母菌株的用途

权利要求书

1.一种MCM7基因的用途，其特征在于，用于在葡萄糖发酵过程中，赋予酵母菌株对有机酸(较佳地为乙酸)的抗性。

2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述MCM7基因的表达在有机酸存在时被诱导。

3.如权利要求1或2所述的用途，其特征在于，所述MCM7基因的序列上游包括一个Haa1p的结合位点。

4.如权利要求1至3中任一项所述的用途，其特征在于，所述MCM7基因的序列上游包括序列SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4。

5.如权利要求1至4中任一项所述的用途，其特征在于，所述酵母菌株属于酵母属，优选地为酿酒酵母。

6.一种筛选在葡萄糖发酵期间对有机酸(优选地为乙酸)有抗性的酵母菌株的方法，其特征在于，包括以下步骤：

-确定在有机酸存在下诱导MCM7基因的表达；和/或

-确定在该菌株的至少一个等位基因中，在MCM7基因上游序列中存在Haa1p结合位点，优选地是序列SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4；和/或

-确定在该菌株的至少一个等位基因中，在染色体II的位置624794处具有碱基G。

7.一种获得在葡萄糖发酵期间对有机酸(优选地为乙酸)有抗性的酵母菌株的方法，其特征在于，包括以下步骤：

-具有不同基因组的两个亲本菌株的孢子形成步骤；

-获得的分离子的大量杂交步骤，

-至少一步分离子的筛选步骤，根据它们能够在有机酸和/或在MCM7上游的序列中存在Haa1p结合位点的存在下，诱导MCM7的表达，优选地确定了序列SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4，和/或根据在染色体II的位置624794存在碱基G。

8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

a)制备来自第一亲本菌株的分离子和来自第二亲本菌株的分离子；

b)从步骤a)的分离子中筛选能够在有机酸和/或在MCM7上游序列中具有Haa1p结合位点的存在下诱导MCM7表达的分离子，优选地是序列SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4，和/或在染色体II的位置624794存在碱基G；

c)将来自第一亲本菌株的并在步骤b)中筛选的分离子与来自第二亲本菌株，任选地在步骤b)中筛选的分离子杂交；

d)从步骤c)中筛选对所述有机酸具有抗性的杂交体。

9.如权利要求7或8所述的方法，其特征在于，第一菌株是根据其对有机酸具有抗性的能力被筛选的，并且第二菌株是根据其另一种感兴趣的特性被筛选的，例如其代谢木糖的能力。

10.如权利要求6至9中任一项所述的方法，其特征在于，所述酵母菌株属于酵母属，优选地为酿酒酵母。

11.如权利要求7至10中任一项所述的方法，其特征在于，所述第一菌株是于2014年3月13日在CNCM保藏的EGAc1菌株，编号为I-4839，并且第二菌株是在2011年10月5日在CNCM保藏的菌株，编号为I-4538。

12.如权利要求6至11中任一项所述的方法，其特征在于，所述对有机酸的抗性是在含有葡萄糖的培养基中测试的。