[发明专利]交替切向流快速收获

权利要求书

1.一种从细胞培养物中收获细胞产物的方法，所述方法包括：

在补料分批或浓缩补料分批培养中培养细胞直到细胞在生物反应器的培养基中产生所需的收获浓度的细胞产物；和

如果活细胞密度(VCD)高于100E6细胞/mL，则使生物反应器的培养基通过交替切向流(ATF)装置，以获得包含细胞产物的渗透物，其中在5-30升/米²/小时(LMH)的通量下以渗滤模式操作所述ATF装置，直到至少90％的细胞产物在渗透物中，或

如果VCD低于100E6细胞/mL，则使培养基通过ATF装置，以获得包含细胞产物的渗透物，其中在10-30LMH的通量下操作所述ATF装置，直到培养基体积下降至这样的体积，其中可以通过过滤维持升高的通量使流体转移高达4个生物反应器体积，然后以渗滤模式操作所述ATF装置，直到至少90％的细胞产物在渗透物中。

2.权利要求1的方法，其中所述渗滤模式是逐步渗滤或连续渗滤。

3.权利要求1的方法，其中所述渗滤使用磷酸盐缓冲盐水作为补充液体。

4.权利要求2的方法，其中所述渗滤使用磷酸盐缓冲盐水作为补充液体。

5.权利要求1至4中任一项的方法，其中对于500升至2000升的体积，所述收获花费少于18小时。

6.权利要求5的方法，其中所述收获花费少于6.0小时。

7.权利要求1至4中任一项的方法，其中所述培养基体积下降至起始体积的5％至30％。

8.权利要求7的方法，其中所述培养基体积下降至所述起始体积的10％-20％。

9.权利要求1至4中任一项的方法，其中所述细胞培养物包含浓缩的补料分批培养物，并且其中所述培养基体积为下降至起始体积的约50％。

10.权利要求1至4中任一项的方法，其中所述ATF装置包括中空纤维过滤器。

11.权利要求10的方法，其中所述过滤器的孔径为0.1至5.0微米或500至1000kD。

12.权利要求1至4中任一项的方法，其中所述细胞培养物是补料分批细胞培养物。

13.权利要求1至4中任一项的方法，其中所述细胞培养物是浓缩的补料分批细胞培养物。

14.权利要求1至4中任一项的方法，其中所述细胞产物是单克隆抗体、酶或病毒。

15.一种系统，其包括：

包括入口和出口的生物反应器；

连接到生物反应器入口的不含细胞产物的流体培养基源；

连接到生物反应器出口的交替切向流(ATF)装置；

连接到ATF装置的出口并配置成从ATF装置移出流体的泵；和

控制器，其被布置和编程为：

在补料分批或浓缩补料分批培养中培养细胞直到细胞在生物反应器的培养基中产生所需的收获浓度的细胞产物；和

如果活细胞密度(VCD)高于100E6细胞/mL，则使培养基通过交替切向流(ATF)装置，以获得包含细胞产物的渗透物，其中在5-30LMH的通量下以渗滤模式操作所述ATF装置，直到至少90％的细胞产物在渗透物中；

如果VCD低于100E6细胞/mL，则使培养基通过ATF装置，以获得包含细胞产物的渗透物，其中在10-30LMH的通量下操作所述ATF装置，直到培养基体积下降至这样的体积，其中可以通过过滤维持升高的通量使流体转移高达4个生物反应器体积，然后以渗滤模式操作所述ATF装置，直到至少90％的细胞产物在渗透物中。