[发明专利]N-乙酰基高丝氨酸在审

专利信息
申请号: 201780059303.2 申请日: 2017-07-26
公开(公告)号: CN109790106A 公开(公告)日: 2019-05-21
发明(设计)人: T.哈斯;S.沙费尔;T.比尔特;S.贝克 申请(专利权)人: 赢创德固赛有限公司
主分类号: C07C233/47 分类号: C07C233/47;C12P13/06
代理公司: 中国专利代理(香港)有限公司 72001 代理人: 李唐;黄希贵
地址: 德国*** 国省代码: 德国;DE
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摘要:
搜索关键词: 高丝氨酸 乙酸 水性培养基 重组细胞 高丝氨酸脱氢酶 天冬氨酸激酶 野生型细胞 乙酰转移酶 乙酰基 生产
【权利要求书】:

1.通式I的化合物

2.权利要求1的化合物,其中所述化合物是O-乙酰基-N-乙酰氨基-L-高丝氨酸或O-乙酰基-N-乙酰氨基-D-高丝氨酸。

3.生产N-乙酰基高丝氨酸和/或其衍生物的方法,所述方法包括:

- 使至少一种重组细胞与乙酸在水性培养基中接触,其中所述重组细胞包含相对于野生型细胞增加的以下的活性:

(a) 酶E1,高丝氨酸脱氢酶(EC1.1.1.3);和/或酶E5,天冬氨酸激酶(EC2.7.2.4);和

(b) 酶E2,高丝氨酸O-乙酰转移酶(EC2.3.1.31),

且所述乙酸在所述水性培养基中维持在至少约0.001 g/L的浓度。

4.根据权利要求3所述的方法,其中所述乙酸是外源产生的。

5.根据权利要求3或4所述的方法,其中所述方法包括:

- 从所述水性培养基中提取N-乙酰基高丝氨酸及其衍生物。

6.根据权利要求3至5中任一项所述的方法,其中所述细胞选自不动杆菌属种(Acinetobacter sp.)、芽孢杆菌属种(Bacillus sp.)、短杆菌属种(Brevibacterium sp.)、伯克霍尔德氏菌属种(Burkholderia sp.)、小球藻属种(Chlorella sp.)、棒杆菌属种(Corynebacterium sp.)、藻青菌(Cyanobacterium)、欧文氏菌属种(Erwinia sp.)、埃希氏菌属种(Escherichia sp.)、克雷伯氏菌属种(Klebsiella sp.)、沙雷氏菌属种(Serratia sp.)、普罗威登斯菌属种(Providencia sp.)、假单胞菌属种(Pseudomonas sp.)、根瘤菌属种(Rhizobium sp.)、沙门氏菌属种(Salmonella sp.)和念珠藻属种(Nostoc sp.)。

7.根据权利要求3至6中任一项所述的方法,其中所述细胞选自谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)和大肠杆菌。

8.根据权利要求3至7中任一项所述的方法,其中所述酶E2是来自谷氨酸棒杆菌ATCC13032的高丝氨酸O-乙酰转移酶(MetX)或其变体。

9.根据权利要求3至8中任一项所述的方法,其中所述酶E2包含氨基酸序列SEQ ID NO:1或其变体。

10.根据权利要求3至9中任一项所述的方法,其中酶E1的活性的增加是高丝氨酸脱氢酶(E1)和/或天冬氨酸激酶(E5)中的至少一个点突变的结果。

11.根据权利要求10所述的方法,其中所述酶E1包含氨基酸序列SEQ ID NO:3或其变体,且所述酶E3包含氨基酸序列SEQ ID NO:4或其变体。

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