[发明专利]用于增强痘病毒中转基因的稳定性的组合物和方法

权利要求书

1.一种在重组痘病毒的连续传代中稳定的重组痘病毒，所述重组痘病毒包含编码具有至少两个可变N-末端重复(VNTR)域的MUC1肽的第一核酸，其中a)对所述至少两个VNTR域的排列进行改组，以及b)对所述至少两个VNTR域进行密码子优化，其中所述重组痘病毒在所述重组痘病毒的连续传代中是稳定的。

2.如权利要求1所述的重组痘病毒，其中所述第一核酸包含至少三个VNTR域。

3.如权利要求1-2中任一项所述的重组痘病毒，其中与SEQ ID NO:6相比，所述至少两个VNTR域的顺序被改组。

4.如权利要求1-3中任一项所述的重组痘病毒，其中与PANVAC相比，a)和b)的存在改善连续传代中的稳定性。

5.如权利要求1-4中任一项所述的重组痘病毒，其中所述第一核酸序列包含与SEQ IDNO:2具有至少95％、96％、97％或98％同一性的核酸序列。

6.如权利要求1-5中任一项所述的重组痘病毒，其中所述第一核酸序列包含SEQ IDNO:2。

7.如权利要求1-6中任一项所述的重组痘病毒，其还包含编码癌胚抗原(CEA)的第二核酸。

8.如权利要求7所述的重组痘病毒，其中所述第二核酸包含SEQ ID NO:13。

9.如权利要求7所述的重组痘病毒，其中所述第二核酸包含所述第二核酸的至少一个重复核苷酸区中的至少一个核苷酸取代，其中所述至少一个重复核苷酸区被定义为a)三个更多个连续重复的G或C核苷酸和/或b)三个或更多个连续重复的T核苷酸。

10.如权利要求9所述的重组痘病毒，其中所述至少一个重复核苷酸区还被定义为a)三个或更多个连续重复的G核苷酸和/或b)三个或更多个连续重复的C核苷酸。

11.如权利要求9-10中任一项所述的重组痘病毒，其中所述重复核苷酸区还被定义为(i)四个或更多个连续重复的核苷酸，(ii)四个或更多个连续的G或C核苷酸，和/或(iii)四个或更多个连续的T核苷酸。

12.如权利要求9-10中任一项所述的重组痘病毒，其中所述重复区还被定义为(i)四个或更多个连续的G核苷酸，(ii)四个或更多个连续的C核苷酸，和/或(iii)四个或更多个连续的T核苷酸。

13.如权利要求9-12中任一项所述的重组痘病毒，其中所述第二核酸包含对所述第二核酸的重复核苷酸区中的至少2个、3个、4个、5个或10个的至少一个取代。

14.如权利要求9-13中任一项所述的重组痘病毒，其中所述第二核酸包含所述第二核酸的至少10个、至少12个、至少15个和/或至少19个重复核苷酸区中的至少一个核苷酸取代。

15.如权利要求9-14中任一项所述的重组痘病毒，其中所述第二核酸包含所述第二核酸的19个区中的至少一个核苷酸取代。

16.如权利要求9-14中任一项所述的重组痘病毒，其中所述第二核酸包含SEQ ID NO:14。

17.如权利要求1-16中任一项所述的重组痘病毒，其中所述重组痘病毒选自正痘病毒和禽痘病毒。

18.如权利要求17所述的重组痘病毒，其中所述正痘病毒是牛痘病毒。

19.如权利要求18所述的重组痘病毒，其中所述牛痘病毒是经修饰的安卡拉牛痘病毒(MVA)。