[发明专利]在乳液微滴中结合多重置换扩增和PCR在审
| 申请号： | 201780059828.6 | 申请日： | 2017-08-09 |
| 公开（公告）号： | CN110088290A | 公开（公告）日： | 2019-08-02 |
| 发明（设计）人： | A·R·阿巴特;D·苏科维奇 | 申请（专利权）人： | 加利福尼亚大学董事会 |
| 主分类号： | C12P19/34 | 分类号： | C12P19/34;C12Q1/686;C12Q1/6844;C12M1/00 |
| 代理公司： | 北京市中伦律师事务所 11410 | 代理人： | 杨黎峰;钟锦舜 |
| 地址： | 美国加利*** | 国省代码： | 美国;US |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 核酸 核酸扩增 多重置换扩增 活体结构 乳液液滴 生物系统 系统提供 检测 分选 活体 乳液 微滴 漂浮 病毒 细胞 自由 改进 | ||
1.一种核酸扩增方法，包括：
e)将核酸和扩增试剂包封在乳液微滴中，其中所述扩增试剂包含非特异性扩增试剂和PCR扩增试剂；
f)使所述乳液微滴经历足以导致所述核酸进行非特异性扩增的扩增条件，以提供扩增产物；
g)使所述乳液微滴经历足以导致来自步骤b)的所述扩增产物进行PCR扩增的扩增条件，以提供PCR扩增产物；以及
h)检测从步骤c)得到的PCR扩增产物。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述非特异性扩增试剂包括多重置换扩增(MDA)试剂。
3.根据权利要求2所述的方法，其中MDA试剂包括在缓冲条件下有活性的聚合酶，其中在所述缓冲条件下Taq DNA聚合酶具有活性。
4.根据权利要求3所述的方法，其中所述聚合酶是Bst聚合酶。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述PCR扩增试剂包含Taq DNA聚合酶。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述乳液微滴是包含被不混溶壳包围的第一可混溶相流体的多重乳液微滴，其中所述多重乳液微滴位于第二可混溶相载体流体中。
7.根据权利要求6所述的方法，其中所述第二可混溶相载体流体是缓冲的水相载体流体。
8.根据权利要求1所述的方法，其中所述第一和第二可混溶相流体是相同的。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的方法，包括在扩增后可检测地标记PCR扩增产物。
10.根据权利要求1-8中任一项所述的方法，其中所述PCR扩增试剂包含可检测地标记的引物和/或探针。
11.根据权利要求1-10中任一项所述的方法，包括用荧光标记可检测地标记所述PCR扩增产物，并通过荧光激活细胞分选术(FACS)分选所述多重乳液微滴。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于加利福尼亚大学董事会，未经加利福尼亚大学董事会许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201780059828.6/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：官能化多硫化物的合成方法
- 下一篇：用于体外糖工程化抗体的方法
