[发明专利]供多重PCR的引物的设计方法

权利要求书

1.一种供多重PCR的引物的设计方法，其是供源于单一细胞的多重PCR的引物的设计方法，包括设定引物设计时的Tm值范围的Tm值范围设定工序，其中，

在进行N次对n个目标区域中m个目标区域进行PCR扩增并统计每个目标区域的序列读取数的试验，并计算每个目标区域的序列读取数的变异系数的情况下，在将第i个目标区域的序列读取数的变异系数的实际值设为CV_i，将为了对第i个目标区域进行PCR扩增所使用的1对引物的平均Tm值设为Tm_i时，

在所述Tm值范围设定工序中，通过下述工序来确定引物的Tm值范围：

由输入装置输入序列读取数的变异系数的目标值CV₀，并存储于存储装置的工序；

输入N次试验中的目标区域数m、第i个目标区域的序列读取数的变异系数的实际值CV_i及为了对第i个目标区域进行PCR扩增所使用的1对引物的平均Tm值Tm_i，并存储于存储装置的工序；

运算装置利用CV_t＝H(CV₀)计算序列读取数的变异系数的阈值CV_t作为目标值CV₀的函数，并存储于存储装置的工序；

运算装置将所述m个目标区域划分为由序列读取数的变异系数CV_i为CV_i≥CV_t的m₁个目标区域组成的R1组、和由序列读取数的变异系数CV_i为CV_i＜CV_t的m₂个目标区域组成的R2组，对于R1组及R2组的各个组，制作横轴取为了对目标区域进行PCR扩增所使用的1对引物的平均Tm值、纵轴取目标区域数的直方图，并存储于存储装置的工序；及，

运算装置计算从R1组的直方图的左端的值、右端的值、及最频值、R2组的直方图的左端的值、及R1组的直方图和R2组的直方图的交点的Tm值中预先指定的一个值，作为Tm值范围的下限值存储于存储装置的工序；

运算装置计算R2组的直方图的右端的值，作为Tm值范围的上限值存储于存储装置的工序；

运算装置读取存储装置所存储的下限值及上限值，显示于显示装置的工序，

其中，n为满足2≤n的整数，m为满足2≤m≤n的整数，N为满足3≤N的整数，i为满足1≤i≤m的整数，m₁及m₂为满足1≤m₁＜m、1≤m₂＜m、m₁+m₂＝m的整数。

2.如权利要求1所述的供多重PCR的引物的设计方法，其中，CV_t＝H(CV₀)＝√2×CV₀。

3.如权利要求1所述的供多重PCR的引物的设计方法，其中，CV_t＝H(CV₀)＝CV₀。