[发明专利]具有降低的免疫原性的HLA I类缺陷的NK-92细胞

权利要求书

1.一种β-2-微球蛋白-修饰的(B2M-修饰的)NK-92细胞，其包含靶向β-2微球蛋白的遗传修饰以抑制β-2微球蛋白的表达。

2.如权利要求1的B2M-修饰的NK-92细胞，其中所述细胞通过敲低或敲除NK-92细胞中的β-2微球蛋白产生。

3.如权利要求2的B2M-修饰的NK-92细胞，包含靶向B2M且抑制其表达的干扰RNA。

4.如权利要求1的B2M-修饰的NK-92细胞，其中由所述细胞表达的β-2-微球蛋白的量与不具有所述靶向β-2-微球蛋白的改变的NK-92细胞相比降低至少50％，至少60％，至少70％或至少80％。

5.如权利要求1的B2M-修饰的NK-92细胞，其中所述细胞通过敲除NK-92细胞中的β-2微球蛋白产生。

6.如权利要求2的B2M-修饰的NK-92细胞，其中所述细胞被修饰以表达包含HLA-E结合肽、B2M和HLA-E重链的单链三聚体。

7.如权利要求6的B2M-修饰的NK-92细胞，其中所述单链三聚体包含B2M(β2微球蛋白)信号肽、Cw*0304前导肽、成熟B2M多肽和成熟HLA-E多肽。

8.如权利要求7的B2M-修饰的NK-92细胞，其中所述Cw*0304前导肽通过柔性接头连接于所述成熟B2M多肽和/或所述成熟B2M多肽通过柔性接头连接于所述成熟HLA-E多肽。

9.如权利要求8的B2M-修饰的NK-92细胞，其中将所述C2*0304前导肽连接于所述成熟B2M多肽的所述柔性接头和/或将所述成熟B2M多肽连接于所述成熟HLA-E多肽的所述柔性接头包含Gly和Ser。

10.如权利要求6的B2M-修饰的NK-92细胞，其中所述HLA-E重链包含成熟HLA-E^G氨基酸序列。

11.如权利要求6的B2M-修饰的NK-92细胞，其中所述单链三聚体包含SEQ ID NO:18的氨基酸序列。

12.如权利要求1的B2M-修饰的NK-92细胞，其中所述B2M-修饰的NK细胞表达至少一种Fc受体或至少一种嵌合抗原受体(CAR)；或者细胞表面上的至少一种Fc受体和至少一种CAR。

13.如权利要求12的B2M-修饰的NK-92细胞，其中所述至少一种Fc受体是人CD16或在对应于成熟形式的CD16多肽的158位的位置处具有缬氨酸的人CD16多肽。

14.如权利要求12的B2M-修饰的NK-92细胞，其中所述至少一种Fc受体，包含编码与SEQID NO:5的氨基酸序列具有至少90％序列同一性的多肽的多核苷酸序列，且包含158位的缬氨酸。

15.如权利要求12的B2M-修饰的NK-92细胞，其中所述至少一种Fc受体是FcγRIII。

16.如权利要求12的B2M-修饰的NK-92细胞，其中所述CAR包含FcεRIγ的胞质结构域。

17.如权利要求12的B2M-修饰的NK-92细胞，其中所述CAR靶向肿瘤相关抗原。

18.如权利要求1的B2M-修饰的NK-92细胞，其中所述细胞进一步修饰以表达细胞因子。

19.如权利要求18的B2M-修饰的NK-92细胞，其中所述细胞因子是白介素-2或其变体。