[发明专利]基于干涉测量在免疫测定中重复使用测试探针和试剂的方法有效
申请号: | 201780064574.7 | 申请日: | 2017-10-27 |
公开(公告)号: | CN110023756B | 公开(公告)日: | 2023-06-30 |
发明(设计)人: | 罗伯特·F·祖克;夏青 | 申请(专利权)人: | 万迈医疗仪器有限公司 |
主分类号: | G01N33/53 | 分类号: | G01N33/53;G01N33/533;G01N33/543 |
代理公司: | 北京商专永信知识产权代理事务所(普通合伙) 11400 | 代理人: | 邬玥;方挺 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 干涉 测量 免疫测定 重复使用 测试 探针 试剂 方法 | ||
1.一种检测多个液体样品中C-反应蛋白CRP分析物的方法,其包含以下步骤:
(a)获得探针,其具有固定在所述探针尖端上针对所述分析物的抗体,其中尖端表面的直径≤5 mm,其中所述抗体为小鼠抗人CRP单株抗体CRP 30,并且其中所述抗体被生物素化并结合到固定在所述探针尖端上的抗生蛋白链菌素;
(b)将所述探针浸入包含pH为6.0-8.5的水溶液的基线容器中持续第一段时间,以确定所述探针尖端的基线干涉测量图案;
(c)将所述探针尖端浸入含有具有所述分析物的液体样品的样品容器中持续第二段时间,以确定在所述探针尖端处形成的免疫复合物的第二干涉测量图案;
(d)通过测量所述第二干涉测量图案和所述基线干涉测量图案之间的干涉测量相移,并针对校准曲线定量所述相移来确定所述样品中的所述分析物浓度;
(e)将所述探针尖端浸入pH 1.0-4.0的酸性溶液中持续10秒至2分钟以从所述探针尖端洗脱所述免疫复合物;和
(f)在第二循环中在第二样品容器中用第二液体样品重复步骤(b)-(e),由此检测多个液体样品中的所述分析物。
2.根据权利要求1所述的方法,其中步骤(d)中的所述校准曲线对于所有量化循环都是相同的。
3.根据权利要求1所述的方法,其中步骤(e)中的所述酸性溶液具有1.5-2.5的pH。
4.根据权利要求1所述的方法,其中在步骤(e)中,将所述探针尖端暴露在2-5个循环的所述酸性溶液处理的脉冲处理中,然后中和10-20秒。
5.根据权利要求1所述的方法,其中步骤(b)-(e)重复3-20次。
6.一种检测多个液体样品中C-反应蛋白CRP分析物的方法,其包含以下步骤:
(a)获得探针,其具有固定在所述探针尖端上的第一抗体,其中尖端表面的直径≤5mm,其中所述第一抗体为小鼠抗人CRP单株抗体CRP 30,并且其中所述第一抗体被生物素化并结合到固定在所述探针尖端上的抗生蛋白链菌素;
(b)将所述探针尖端浸入含有具有所述分析物的液体样品的样品容器中;
(c)将所述探针尖端浸入含有缓冲液的洗涤容器中以洗涤所述探针;
(d)将所述探针浸入包含pH为6.0-8.5的水溶液的基线容器中持续第一段时间,以确定所述探针尖端的基线干涉测量图案;
(e)将所述探针浸入包含pH为6.0-8.5的第二抗体的试剂容器中持续第二段时间,以确定在所述探针尖端处形成的免疫复合物的第二干涉测量图案;
(f)通过测量所述第二干涉测量图案和所述基线干涉测量图案之间的干涉测量相移,并针对校准曲线定量所述相移来确定所述样品中的所述分析物浓度;
(g)将所述探针尖端浸入pH 1.0-4.0的酸性溶液中持续10秒至2分钟以从所述探针尖端洗脱所述免疫复合物;和
(h)在第二循环中在第二样品容器中用第二液体样品重复步骤(b)-(g),由此检测多个液体样品中的所述分析物。
7.根据权利要求6所述的方法,其中步骤(f)中的所述校准曲线对于所有量化循环都是相同的。
8.根据权利要求6所述的方法,其中步骤(g)中的所述酸性溶液具有1.5-2.5的pH。
9.根据权利要求6所述的方法,其中在步骤(g)中,将所述探针尖端暴露在2-5个循环的所述酸性溶液处理的脉冲处理中,然后中和10-20秒。
10.根据权利要求6所述的方法,其中步骤(b)-(g)重复3-20次。
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