[发明专利]经人工操纵的血管生成调控系统

权利要求书

1.经人工操纵的新血管形成相关因子，所述人工操纵的新血管形成相关因子选自于由在核酸序列中具有修饰的如下基因所组成的组：VEGFA基因、HIF1A基因、ANGPT2基因、EPAS1基因以及ANGPTL4基因。

2.如权利要求1所述的经人工操纵的新血管形成相关因子，其中，通过引导核酸-编辑蛋白复合体人工产生所述核酸序列中的修饰。

3.如权利要求1所述的经人工操纵的新血管形成相关因子，其中，所述新血管形成相关因子为选自于由以下基因所组成的组中的一种或多种：VEGFA基因、HIF1A基因、ANGPT2基因、EPAS1基因以及ANGPTL4基因。

4.如权利要求1所述的经人工操纵的新血管形成相关因子，其中，所述基因是通过引导核酸-编辑蛋白复合体进行人工操纵的新血管形成相关因子，

其中，所述经人工操纵的新血管形成相关因子包括核酸的一种或多种修饰，所述修饰为

在组成所述新血管形成相关因子的核酸序列中的原型间隔区邻近基序(PAM)序列中或在临近所述PAM序列的5'端和/或3'端的连续的1bp-50bp碱基序列区中的一个或多个核苷酸的删除或插入、利用不同于野生型基因的一个或多个核苷酸进行的置换、以及一个或多个外源核苷酸的插入中的至少一种，

或者

在组成所述新血管形成相关因子的核酸序列中的一个或多个核苷酸的化学修饰。

5.如权利要求1所述的经人工操纵的新血管形成相关因子，其中，所述核酸的修饰发生于所述基因的启动子区。

6.如权利要求1所述的经人工操纵的新血管形成相关因子，其中，所述核酸的修饰发生于所述基因的外显子区。

7.如权利要求1所述的经人工操纵的新血管形成相关因子，其中，所述核酸的修饰发生于所述基因的内含子区。

8.如权利要求1所述的经人工操纵的新血管形成相关因子，其中，所述核酸的修饰发生于所述基因的增强子区。

9.如权利要求4所述的经人工操纵的新血管形成相关因子，其中，所述PAM序列为例如以下序列中的一种或多种，所述序列以5'至3'方向来描述：

NGG，N为A、T、C或G；

NNNNRYAC，N各自独立地为A、T、C或G；R为A或G；Y为C或T；

NNAGAAW，N各自独立地为A、T、C或G；W为A或T；

NNNNGATT，N各自独立地为A、T、C或G；

NNGRR(T)，N各自独立地为A、T、C或G；R为A或G；Y为C或T；以及

TTN，N为A、T、C或G。

10.如权利要求2所述的经人工操纵的新血管形成相关因子，其中，所述编辑蛋白包括选自于由如下编辑蛋白所组成的组的一种或多种：

由酿脓链球菌(Streptococcus pyogenes)衍生而来的Cas9蛋白、由空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni)衍生而来的Cas9蛋白、由嗜热链球菌(Streptococcusthermophilus)衍生而来的Cas9蛋白、由金黄色葡萄球菌(Streptocuccus aureus)衍生而来的Cas9蛋白、由脑膜炎奈瑟菌(Neisseria meningitidis)衍生而来的Cas9蛋白以及Cpf1蛋白。

11.引导核酸，所述引导核酸能够与选自于由如下基因所组成的组中的一种或多种基因的核酸序列中的靶序列SEQ ID NO:1-SEQ ID NO:79分别形成互补结合：

VEGFA基因、HIF1A基因、ANGPT2基因、EPAS1基因以及ANGPTL4基因。