[发明专利]用于通过单倍体诱导来进行基因组编辑的方法和组合物在审
申请号: | 201780067819.1 | 申请日: | 2017-09-13 |
公开(公告)号: | CN109936977A | 公开(公告)日: | 2019-06-25 |
发明(设计)人: | C·L·阿姆斯特朗;E·J·卡吉尔;F·董;J·C·兰姆;H·W·拉吕;R·J·劳伦斯;T·S·雷姆 | 申请(专利权)人: | 孟山都技术公司 |
主分类号: | A01H1/02 | 分类号: | A01H1/02;C12N15/82 |
代理公司: | 北京市金杜律师事务所 11256 | 代理人: | 孟凡宏;谢燕军 |
地址: | 美国密*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 单倍体诱导 植物育种 基因组 基因 改进 | ||
1.一种修饰植物基因组的方法,所述方法包括:
提供包含至少一种基因组编辑组分(GEC)的第一植物;
使所述第一植物与第二植物杂交,其中所述至少一种GEC修饰所述第二植物的基因组,由此产生所述第二植物的经修饰基因组;以及
回收由使所述第一植物和所述第二植物杂交获得的第三植物,其中所述第三植物包含所述第二植物的所述经修饰基因组,并且其中所述第三植物大致上缺乏所述GEC。
2.如权利要求1所述的方法,其中所述第一植物是单倍体诱导物。
3.如权利要求2所述的方法,其中所述第一植物是玉米母系单倍体诱导物。
4.如权利要求2所述的方法,其中所述第三植物大致上缺乏所述第一植物的基因组。
5.如权利要求1所述的方法,其中所述第二植物的所述经修饰基因组选自由以下组成的组:核基因组、线粒体基因组和质体基因组。
6.如权利要求1所述的方法,其中所述方法进一步包括:
使所述第三植物或接合子的核基因组加倍,由此产生包含加倍核基因组的第三植物。
7.如权利要求6所述的方法,其中所述核基因组的所述加倍由使用选自由以下组成的组的染色体加倍剂所致:一氧化二氮气体、秋水仙碱、氨磺乐灵、甲基胺草磷、氟乐灵、咖啡因和拿草特。
8.如权利要求6所述的方法,其中所述方法进一步包括:
从包含加倍核基因组的所述第三植物或接合子产生子代植物或种子,其中所述子代植物或种子的基因组包含所述第二植物的所述经修饰基因组。
9.如权利要求1所述的方法,其中所述第二植物的所述经修饰基因组包含至少一个选自由以下组成的组的修饰:一个或多个核苷酸的插入、取代、缺失、重复、倒位和易位。
10.如权利要求1所述的方法,其中所述至少一种GEC包含至少一个选自由以下组成的组的启动子:组成型启动子、诱导型启动子和组织特异性启动子。
11.如权利要求10所述的方法,其中所述组织特异性启动子选自由以下组成的组:胚特异性启动子、配子特异性启动子和早期接合子特异性启动子。
12.如权利要求1所述的方法,其中所述第一植物的基因组包含至少一个辅助基因。
13.如权利要求12所述的方法,其中所述至少一个辅助基因选自由以下组成的组:核酸外切酶盒、DN Ku70和针对至少一种NHEJ组分的RNAi盒。
14.如权利要求1所述的方法,其中所述至少一种GEC包含至少一种重组酶或至少一种核酸内切酶。
15.如权利要求14所述的方法,其中所述至少一种核酸内切酶选自由以下组成的组:CRISPR相关核酸酶、转录活化子样效应物核酸酶(TALEN)、TALE样蛋白、锌指核酸酶和兆碱基大范围核酸酶。
16.如权利要求14所述的方法,其中所述至少一种重组酶选自由以下组成的组:连接于DNA识别基序的酪氨酸重组酶和连接于DNA识别基序的丝氨酸重组酶。
17.如权利要求16所述的方法,其中连接于DNA识别基序的所述酪氨酸重组酶选自由以下组成的组:Cre重组酶、Gin重组酶、FLP重组酶和Tnp1重组酶。
18.如权利要求16所述的方法,其中连接于DNA识别基序的所述丝氨酸重组酶选自由以下组成的组:Bxb1整合酶、phiC31整合酶、R4整合酶和TP-901整合酶。
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