[发明专利]穿心莲提取物及其制备方法和用途

说明书

本发明公开了高浓度活性成分的穿心莲提取物、制备方法以及治疗自身免疫性疾病和炎症性疾病的医药用途。

技术领域

本发明公开了穿心莲(Andrographis paniculata)提取物、其制备方法和其医药用途。

背景技术

穿心莲为爵床科植物穿心莲Andrographis Paniculata(Brun.f.)Nees的干燥地上部分，其广泛分布于亚洲，如中国、印度等。作为一种中药，穿心莲已经在临床上用于治疗呼吸道感染、急性痢疾、胃肠炎、发热和流感、高血压以及其他疾病。

据报道，穿心莲中的活性成分包含穿心莲内酯类化合物，所述穿心莲内酯类化合物选自例如穿心莲内酯(AND)、新穿心莲内酯(NAND)、14-去氧穿心莲内酯(DAND)和14-去氧-11，12-去氢穿心莲内酯(DDAND)等。许多工艺已经被开发用于从穿心莲中提取活性成分。

WO 2009/059158公开一种穿心莲提取物制备方法，其中用90％乙醇回流提取穿心莲的干燥地上部分，收集乙醇部分再用90％乙醇提取一次，合并两次乙醇提取物，在去除乙醇后加入糊精，经干燥粉碎，得到穿心莲提取物。在该穿心莲提取物中，总穿心莲内酯在该提取物干粉中的重量百分比含量为10-22％，其中AND、DAND、DDAND和NAND在提取物中的重量百分比含量分别为例如6-10％、0.01-2％、2-4％和2-4％。

核因子κB(NF-κB)是一类转录因子蛋白，其家族成员包括RelA(p65)、RelB、c-Rel、NF-κB1(p50)以及NF-κB2(p52)，它们形成同二聚体或异二聚体与靶基因上的κB序列结合调节基因转录。NF-κB参与调控的靶基因具有广泛的生物学功能，如调控免疫细胞的增殖、分化、成熟和活化，所以NF-κB在固有免疫应答和适应性免疫应答中发挥了重要的调节作用。例如，NF-κB在免疫耐受形成中扮演着关键角色，包括中枢耐受和调节性T细胞(Treg)的外周功能。因此，NF-κB的失调被认为是自身免疫性疾病慢性炎症的发病机理之一。

长期以来，NF-κB的激活被认为是典型的促炎症信号通路，主要是通过促炎细胞因子如白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)来激活NF-κB。此外，NF-κB的活化可以上调许多促炎介质的表达，包括细胞因子、趋化因子和细胞粘附分子。这些促炎介质和IL-1B、TNF-α一起在慢性炎性疾病如类风湿性关节炎(RA)、炎性肠病(IBD)、牛皮癣、系统性红斑狼疮(SLE)、哮喘和慢性阻塞性肺疾病(COPD)的发病机理中扮演了重要角色。因此，抑制NF-κB信号通路是自身免疫性疾病和炎性疾病的潜在治疗方法。

IL-1β和TNF-α是自身免疫性疾病慢性炎症中关键的促炎细胞因子。几种TNF-α的中和抗体(如Humira)和可溶性TNF-α受体(Enbrel)已被批准用于自身免疫性疾病如RA和IBD的临床治疗。与TNF-α一样，IL-1β也是由炎症刺激产生，并通过激活其受体IL-1R，启动信号级联反应，介导各种生理反应包括炎症和免疫反应。例如在RA中，IL-1β刺激骨吸收并通过诱导蛋白多糖的损耗而引发组织损伤，如软骨降解。同时在这些RA患者中，滑膜中IL-1R受体拮抗剂(IL-1Ra)浓度不足，所以无法抵消IL-1β浓度的高带来的影响。

阿那白滞素(Kineret)是一种重组的IL-1Ra蛋白，它竞争性地抑制IL-1β与其受体的结合，从而阻止通过该途径发生的炎症。FDA批准阿那白滞素用于治疗RA和新生儿发病多系统炎性疾病(NOMID)。有时也用于治疗较不常见的疾病，如成人斯蒂尔病和白塞病。阿那白滞素也可用于狼疮肾炎的治疗，因为在狼疮肾炎中，肾小球基底膜中的胞外DNA和抗dsDNA抗体形成复合物，导致巨噬细胞IL-1β释放到相邻的系膜细胞IL-1受体上，从而引发炎症反应。

炎性肠病(IBD)包括以炎症性细胞浸润消化道粘膜为特征的慢性胃肠道疾病。溃疡性结肠炎(UC)和克罗恩病(CD)是其中两种常见的疾病。