[发明专利]用于鉴定和表征T细胞受体、T细胞抗原及其功能性相互作用的工程化的多组件系统

权利要求书

1.一种多组件系统，其中

第一组件是工程化的TCR-呈递细胞(eTPC)，称为组件A，其中组件A缺乏功能形式的分析物抗原呈递复合体(aAPX)和/或分析物抗原分子(aAM)中的至少一个家族的内源性表面表达，缺乏TCR链α，β，δ和γ的内源性表达，并表达CD3蛋白，和含有两个另外的单个组件，称为B和D，B和D不同且各自分别是基因组接收位点，用于整合编码至少一个分析物TCR链α，β，δ或γ的单个ORF，和/或编码分析物TCR链对的两个ORF，并且其中基因组接收位点B和D各自选自

a.设计用于重组酶介导的盒交换(RMCE)的合成构建体

b.设计用于定点同源重组的合成构建体；

和

第二组件是基因供体载体，称为组件C，用于递送编码分析物TCR链的ORF，其中组件C与组件B匹配，并且其中组件C设计用于递送至组件B

c.单个编码至少一个分析物TCR链α，β，δ和/或γ的ORF，或

d.两个编码分析物TCR链对的ORF，

并且其中c和d任选地编码整合的选择标记，使得分析物TCR链能表达为与组件A上CD3复合的TCR表面蛋白(TCRsp)。

2.根据权利要求1的多组件系统，其中aAPX家族选自

a.HLA I类

b.HLA II类

c.非HLA抗原呈递复合体。

3.根据权利要求1的多组件系统，其中称为E的另一组件是遗传载体，其中组件E被设计用于递送编码一种分析物TCR链α，β，δ或γ的第一ORF至组件D，使得被整合到组件B的、编码第二分析物TCR链的ORF能够与第一分析物TCR链α，β，δ或γ互补配对，表达这两种ORF以形成在组件A上的TCRsp，并且任选地，其中组件E编码整合选择标记。

4.根据前述权利要求中任一项的多组件系统，其中组件A还含有称为F的组件，其是一种合成的基因组TCR-刺激响应元件，选自：

a.单组件合成构建体，其含有至少一种天然启动子和/或至少一种合成启动子和至少一种报道分子

b.多组件合成构建体，其设计为具有至少一种天然启动子和/或至少一种合成启动子和至少一种报道分子，

并且其中a和/或b的活化依赖于选自合成途径、天然途径或其组合的至少一种信号转导途径。

5.根据权利要求1的多组件系统，其中包括基因组接收位点B和D，并且它们两者均是设计用于重组酶介导的盒交换(RMCE)的合成构建体。

6.根据权利要求1所述的多组件系统，其中aAM选自

a.从分析物抗原分子ORF翻译的多肽或多肽复合体

b.衍生自从分析物抗原分子ORF翻译的多肽的肽

c.衍生自改变工程化的TCR-呈递细胞(组件A)蛋白质组的肽

d.衍生自改变工程化的TCR-呈递细胞(组件A)蛋白质组的多肽

e.衍生自改变工程化的TCR-呈递细胞(组件A)代谢物组的代谢物。

7.根据权利要求1所述的多组件系统，其中组件A表达CD4和/或CD8。

8.根据权利要求7所述的多组件系统，其中组件A表达另外的TCR共同受体。

9.根据权利要求8的多组件系统，其中组件A表达CD28和/或CD45。