[发明专利]被多巴胺官能化的硫酸化透明质酸

说明书

公开了2级硫酸化透明质酸，其具有2‑60％摩尔、优选15‑35％并且甚至更优选20‑25％的被多巴胺官能化的羧基，所述多巴胺通过酰胺键或通过间隔体直接缀合，所述间隔体具有用于与透明质酸的羧基形成酰胺键的氨基和用于与多巴胺的氨基形成酰胺键的羧基。

本发明涉及通过酰胺键被多巴胺官能化的硫酸化透明质酸，所述酰胺键可以是直接的或通过适合的间隔体基团。本发明化合物与具有带正电荷的可电离基团的药物、特别是抗生素形成盐。本发明的另一个目的是所述盐及其用于涂覆一般可植入活生物体或生物医学装置中的钛内假体的用途。

现有技术

透明质酸(HA)是由D-葡糖醛酸和N-乙酰基-D-葡糖胺的交替残基组成的杂多糖，其具有直链，分子量范围在50000至13×10⁶Da之间，这取决于获得它的来源和使用的制备方法。

透明质酸在人体中实际上普遍存在，它在其中起重要作用，特别是作为许多组织的细胞的机械支持物，例如皮肤、肌腱、肌肉和软骨。HA与其CD44膜受体和阿片样受体的相互作用也是已知的。

已知O-硫酸化HA衍生物，其中-OH基团被硫酸酯化。O-硫酸化可以通过已知技术进行(参见，例如EP702699和EP940410)；“硫酸化度”是指每摩尔HA二聚体(DSmol)中的硫酸酯基团的摩尔数；特别地：

1级硫酸化定义DSmol介于0.5与1.5之间；

2级硫酸化定义DSmol介于1.5与2.5之间；

3级硫酸化定义DSmol介于2.5与3.5之间。

通常，HAS容易穿过皮肤屏障，从而简化了与其相关的物质的通过，因此是药理学和生物学活性分子的皮肤吸收的优异载体。

还发现(WO2010130468；WO2010130466)HAS具有药理学性质：它是有效的抗炎剂，其通过有效调节许多促炎细胞因子和抗炎细胞因子的活性来发挥其作用。因此，HAS适用于治疗由细胞因子水平改变介导的障碍(类风湿性关节炎、哮喘、全身和皮肤自身免疫疾病、病毒感染、特应性皮炎、湿疹、白癜风、淋巴瘤等)。

多巴胺合成中的氨基酸中间体DOPA(1-3,4-二羟基苯丙氨酸)是已知的神经递质，并且最近也作为粘附物质进行了研究。已经在称为“紫贻贝(Mytilus edulis)足蛋白”(Mefp，特别是Mefp-3和Mefp-5)的蛋白质的氨基酸组成中发现了显著浓度的DOPA残留物，其构成了紫贻贝(Mytilus edulis)的花序梗，通常称为贻贝，粘附在表面上。DOPA的关键特征是儿茶酚基团；这启示高浓度的儿茶酚单元在促进与多个表面的粘附方面起着关键作用，包括玻璃、塑料、陶瓷和基于金属和金属氧化物的表面。尽管尚未完全理解发生所述粘附的机理，但是当儿茶酚基团采取醌的形式时，已知在酸性介质(pH＝5)和碱性介质(pH＝8)中都发生粘附。由于多巴胺衍生物也具有相同的特性，所以DOPA和多巴胺在粘附活性方面被无差别地定义并且用于科学文献中。

HA，“原样”和其硫酸化形式，已经与其它聚合物组合用于金属(通常是钛)和聚合物(例如PU)假体的涂层中，以促进生物和血液相容性(EP1060204)。

DOPA也已经用作粘合剂以促进与具有金属核的其它分子(通常是聚合物)的键合(Lee等人，Adv Mat,2008,20,4154-4157)。

最后，存在这样的实例，其中金属假体涂覆有与聚合物缀合的DOPA，所述聚合物又可以与抗生素键合，从而降低细菌增殖的可能性。例如，Lee等人(Bone,2012,50,974-982)描述了与肝素缀合并且进一步被抗生素和BMP2官能化的DOPA，以促进钛牙科假体的骨整合。选择肝素是因为它含有硫酸酯基团，使得缀合物完全带负电荷，因此能够与带正电荷的抗生素键合。然而，肝素的存在是至关重要的，因为其众所周知的抗凝活性可能存在问题并且在植入期间和之后产生异常出血。

本发明的描述