[发明专利]用于生物控制疾病传播性蚊子的新型副转基因系统

权利要求书

1.一种控制蚊子病原体的方法，包括：

引入基因修饰的肠道细菌，其配置用于定殖表达dsRNA多核苷酸的蚊子肠道，所述的dsRNA多核苷酸针对病毒病原体中的必需基因；

表达所述的dsRNA多核苷酸；和

通过dsRNA诱导的RNA干扰机制抑制所述必需基因表达。

2.如权利要求1所述的控制蚊子病原体的方法，其中所述的病毒病原体包括寨卡病毒。

3.如权利要求1所述的控制蚊子病原体的方法，其中所述的dsRNA多核苷酸选自：1号序列、2号序列、3号序列、4号序列和5号序列，其中所述的抑制性RNA多核苷酸靶向6号序列中的序列，并在所述的6号序列中所述抑制性RNA多核苷酸被转录以产生所述dsRNA多核苷酸分子。

4.如权利要求1所述的控制蚊子病原体的方法，其中所述的dsRNA多核苷酸由所述的基因修饰的肠道细菌分泌，通过内吞、囊泡运输和/或吞噬作用被所述蚊子肠道中的上皮细胞摄取，其中所述的dsRNA多核苷酸在所述蚊子中诱导RNA干扰机制。

5.一种携带病原体的蚊子的生物控制系统，包括以下步骤：

产生表达抑制性核糖核酸(RNA)多核苷酸的基因修饰细菌，其被配置为下调至少一种病原体基因的表达；和

向蚊子体内施用有效量的所述基因修饰的细菌，使得所述抑制性RNA多核苷酸配置为下调至少一种病原体基因的表达，所述抑制性RNA多核苷酸诱导RNA干扰机制，导致下控制制所述病原体感染的蚊子的所述病原体基因。

6.如权利要求5所述的携带病原体的蚊子的生物控制系统，其中所述蚊子是选自埃及伊蚊、白纹伊蚊和冈比亚按蚊的物种。

7.如权利要求6所述的携带病原体的蚊子的生物控制系统，其中所述蚊子包括选自：能够将疾病传播给哺乳动物有机体的雌蚊；蚊子幼虫、三龄幼虫、蛹和成年蚊子。

8.如权利要求7所述的携带病原体的蚊子的生物控制系统，其中所述对蚊子体内施用有效量的所述基因修饰的细菌的步骤包括通过以下一种或多种方法施用有效量的所述转基因细菌：浸泡、喷雾、注射、喂食、雾化喂食、环境雾化喂食、水源中的环境雾化喂食、冻干、冷冻干燥、微胶囊化、干燥、在含水载体中、在溶液中、刷涂、修整、滴涂和涂覆。

9.如权利要求5所述的携带病原体的蚊子的生物控制系统，其中所述基因修饰的细菌包括：选自图2中鉴定组的内共生肠道细菌，名为示例性副转基因细菌菌株的表1中的细菌，大肠杆菌菌株JC8031，和/或自养性内共生肠道细菌，RNaseIII缺陷型肠道细菌，以及表达和/或过表达名为辅助基因的表2中鉴定的一种或多种辅助基因的肠道细菌，副转基因细菌和内共生细菌。

10.如权利要求5所述的携带病原体的蚊子的生物控制系统，其中所述抑制性RNA多核苷酸包含双链RNA(dsRNA)多核苷酸分子。

11.如权利要求10所述的携带病原体的蚊子的生物控制系统，其中所述dsRNA多核苷酸分子包含在可转化质粒中编码的双链dsRNA多核苷酸分子，其可操作地连接于启动子。

12.如权利要求11所述的携带病原体的蚊子的生物控制系统，其中所述可转化质粒包含表达名为辅助基因的表2所鉴定的一种或多种辅助基因的可转化质粒。

13.如权利要求5所述的携带病原体的蚊子的生物控制系统，其中所述病原体基因包括病毒病原体基因、细菌病原体基因、疟原虫病原体基因、线虫病原体基因。

14.如权利要求13所述的携带病原体的蚊子的生物控制系统，其中所述病毒病原体基因包含寨卡基因，所述寨卡基因选自NS2B、NS3和NS4。