[发明专利]亲和-寡核苷酸缀合物及其用途在审
| 申请号： | 201780072719.8 | 申请日： | 2017-01-12 |
| 公开（公告）号： | CN109996889A | 公开（公告）日： | 2019-07-09 |
| 发明（设计）人： | 弗朗索瓦·维格纳尔特;阮格汉姆·阿德里安·布里格斯;斯蒂芬·J·戈德弗莱斯;布莱恩·J·贝尔蒙特 | 申请（专利权）人： | 阿布维特罗有限责任公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6804 | 分类号： | C12Q1/6804;C12Q1/6869;C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京安信方达知识产权代理有限公司 11262 | 代理人： | 王玮玮;郑霞 |
| 地址： | 美国华*** | 国省代码： | 美国;US |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 寡核苷酸 缀合物 单个细胞 四聚体 | ||
1.一种选择T细胞受体(TCR)的方法，包括
(a)使多个pMHC-寡核苷酸缀合物分子与多个T细胞接触；
(b)将容器条形码化多核苷酸或其互补物附接至
(i)多个容器中的容器中的pMHC-寡核苷酸缀合物分子的寡核苷酸部分，和
(ii)来自所述容器中的多个T细胞中的单个T细胞的TCR多核苷酸；和
(c)对所述寡核苷酸部分或其互补物和所述TCR多核苷酸或其互补物测序，从而产生序列信息。
2.一种确定T细胞受体(TCR)的结合亲和力的方法，包括
(a)使多个pMHC-寡核苷酸缀合物分子与多个T细胞接触；
(b)对所述寡核苷酸部分或其互补物测序，从而产生序列信息；和
(c)基于所述序列信息确定TCR与pMHC寡核苷酸缀合物的结合亲和力。
3.一种选择T细胞受体(TCR)的方法，包括
(a)使多个pMHC-寡核苷酸缀合物分子与多个T细胞接触，其中所述pMHC-寡核苷酸缀合物分子包括检测部分；
(b)基于所述检测部分的检测，从(a)的所述多个T细胞获得富集的T细胞群体；
(c)从所富集的群体分离与pMHC-寡核苷酸缀合物分子结合的单个T细胞到多个容器中的第一容器中，
(d)将容器条形码化多核苷酸或其互补物附接至
(i)所述第一容器中的所述pMHC-寡核苷酸缀合物分子的寡核苷酸部分，和
(ii)来自所述第一容器中的所述单个T细胞的TCR多核苷酸；和
(e)对所述寡核苷酸部分或其互补物和所述TCR多核苷酸或其互补物测序，从而产生序列信息。
4.一种选择T细胞受体(TCR)的方法，包括
(a)使多个pMHC-寡核苷酸缀合物分子与多个T细胞接触，其中所述pMHC-寡核苷酸缀合物分子包括检测部分；
(b)基于所述检测部分的检测，从(a)的所述多个T细胞获得富集的T细胞群体；
(c)从所富集的群体分离与pMHC-寡核苷酸缀合物分子结合的单个T细胞到多个容器中的第一容器中，
(d)对所述寡核苷酸部分或其互补物和所述TCR多核苷酸或其互补物测序，从而产生序列信息；和
(e)基于所述序列信息确定由所述TCR多核苷酸编码的TCR与所述pMHC-寡核苷酸缀合物的结合亲和力。
5.如权利要求3或4所述的方法，其中所富集的T细胞群体包括占总T细胞的一定比率的与pMHC-寡核苷酸缀合物分子结合的T细胞，所述比率高于所述接触后与pMHC-寡核苷酸缀合物分子结合的T细胞占所述多个T细胞的总T细胞的比率。
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