[发明专利]EN2蛋白的免疫原性片段肽或特异性识别其的抗体组合物

说明书

本发明涉及EN2蛋白的免疫原性片段肽或特异性识别其的抗体组合物。借助本发明，可以通过特异性识别该肽的方法对EN2蛋白进行量化。此外，与现有的EN2蛋白抗体相比，使用该肽制备的抗体具有显著更好的检测灵敏度，因此可以用作前列腺癌的诊断剂组合物。

技术领域

本发明涉及EN2蛋白的免疫原性片段肽或特异性识别其的抗体组合物。

背景技术

前列腺是位于膀胱下方和直肠前方的核桃大小的男性生殖器官，并且用于产生精液并储存其的一部分。前列腺的上部与从膀胱连接到尿道的膀胱颈相邻并固定到前耻骨前列腺韧带，其下部由泌尿生殖膈膜固定。大多数发生在前列腺中的癌症是在前列腺细胞中形成的腺癌(腺细胞癌)。可以根据肿瘤组织的分化程度和细胞的特征对癌症的类型进行分类。

前列腺癌是世界上最常见的泌尿生殖系统肿瘤之一。在美国，2016年约180,890人被新诊断为前列腺癌，占美国所有新肿瘤诊断的10.7％，前列腺癌是继乳腺癌和肺癌之后的是第三种最常发生的肿瘤类型。基于2009年至2013年的全球统计数据，每100,000名男性中有129.4名男性患有前列腺癌，而根据2016年的统计数据，26,120名前列腺癌患者死亡。此外，前列腺癌在50岁之前是一种罕见的疾病，但是在50岁之后迅速增加。最近，由于寿命期望的延长，韩国老年男性的数量急剧增加，因此需要持续管理以通过早期诊断预防前列腺癌的恶化(例如转移等)。

特别是，人前列腺癌似乎具有转移到骨的趋势，并且已知不可避免地从雄激素依赖状态发展到雄激素抗性状态，从而提高患者死亡率。此外，约25％进行过前列腺癌治疗的男性因疾病复发需要另外治疗，而前列腺癌目前是美国男性癌症相关死亡的第二大原因。因此，前列腺癌的早期诊断和治疗是必要的。

目前使用的直接前列腺癌诊断方法的实例包括对前列腺直接成像的方法或活组织检查诊断方法。在通过直接成像或活组织检查进行诊断的情况下，难以在初始阶段诊断前列腺癌的发病，因此迫切需要开发用于体外诊断的方法。

作为间接方法，存在可使用前列腺特异性抗原(prostate-specific antigen，PSA)测定在体外进行的诊断方法。然而，用于诊断的PSA不仅在恶性前列腺上皮中产生，而且在正常和良性组织中也产生，从而导致前列腺癌检测中的高假阳性率。此外，血清PSA水平的显著提高可用于诊断前列腺癌的有效标准方法，而PSA血清水平中约2至10ng/mL的微弱提高使其无法达到明确的前列腺癌诊断。在这样的微弱提高的情况下，血清PSA可源自非肿瘤性疾病，例如良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia，BPH)、前列腺炎或其他物理创伤，并且用于前列腺癌诊断的PSA分析具有与检测特异性相关的问题。

因此，使用新生物标志物诊断前列腺癌被认为是重要的，并且已经进行了对其的研究(韩国专利申请公开No.10-2009-0111307)，但仍然不够。最近，已经提出了使用EN2(锯齿状蛋白-2(Engrailed-2))作为生物标志物来诊断前列腺癌的方法，并且公知EN2作为能够解决在常规前列腺癌诊断中使用的PSA(前列腺特异性抗原)测定的检测特异性问题的生物标志物。EN2蛋白在细胞中作为转录因子发挥作用并且仅在前列腺癌细胞中过表达，不期望地引起DNA转录调节病症。此外，当EN2在前列腺癌细胞中的表达提高时，尿液排泄的EN2蛋白的量也会提高，因此EN2适合在体外分析中使用。因此，美国专利No.8460882、日本专利申请公开No.2012-532621和美国专利No.8722643公开了识别EN2蛋白的诊断组合物，韩国专利申请公开No.10-2016-0077788公开了与EN2特异性结合的DNA适配体。

通常，术语“抗体”意指将外部物质(具有至少预定尺寸和条件的物质)(抗原)注射到生物体中，并且在该生物体中形成具有能够通过体液免疫应答特异性识别所述外部物质之位点(表位)的抗体，然后从血液中收集并与血清相分离。由此形成的抗体是具有多个能够识别抗原的位点的多克隆抗体。