[发明专利]用于产生内皮细胞的方法在审
| 申请号： | 201780074594.2 | 申请日： | 2017-12-01 |
| 公开（公告）号： | CN109996866A | 公开（公告）日： | 2019-07-09 |
| 发明（设计）人： | 山本由姬;榎龙嗣;户坂泰弘;山口庸子;峰野纯一 | 申请（专利权）人： | 宝生物工程株式会社 |
| 主分类号： | C12N5/0735 | 分类号： | C12N5/0735;C12N5/071;C12N5/10 |
| 代理公司： | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人： | 初明明;黄希贵 |
| 地址： | 日本滋贺*** | 国省代码： | 日本;JP |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 内皮细胞 心肌细胞 内皮祖细胞 中胚层细胞 多能干细胞诱导 治疗心脏疾病 多能干细胞 混合物 壁细胞 高效率 胚状体 可用 | ||
1. 一种用于产生内皮细胞的方法，其包括按以下顺序进行：
(a) 在不形成胚状体的情况下，从多能干细胞诱导包含内皮祖细胞的中胚层谱系细胞群；和
(b) 在存在RepSox的情况下培养包含内皮祖细胞的中胚层谱系细胞群。
2.权利要求1的方法，其中所述多能干细胞为胚胎干细胞(ES细胞)或诱导性多能干细胞(iPS细胞)。
3.权利要求1或2的方法，其中在步骤(a)中在以下培养基中依序培养所述多能干细胞：
(i) 包含激活素A的培养基，
(ii) 包含骨形态发生蛋白4的培养基，和
(iii) 包含血管内皮生长因子的培养基。
4. 权利要求3的方法，其中(ii) 包含骨形态发生蛋白4的培养基进一步包含碱性成纤维细胞生长因子。
5. 权利要求1~4中任何一项的方法，其特征为在步骤(a)之后进一步包括(a') 从所述中胚层谱系细胞群分离内皮祖细胞。
6.权利要求5的方法，其中在步骤(a')中，激酶插入结构域受体阳性细胞被分离为内皮祖细胞。
7.权利要求1~6中任何一项的方法，其中在步骤(b)之前，包含内皮祖细胞的中胚层谱系细胞群或分离的内皮祖细胞在没有RepSox的培养基中进行培养。
8. 权利要求1~7中任何一项的方法，其特征为在步骤(b)之后进一步包括(c) 冷冻内皮细胞。
9. 一种用于产生心肌层的方法，其包括：
根据权利要求1~8中的任何一项定义的方法产生内皮细胞，和
将所述内皮细胞与心肌细胞和壁细胞混合以培养所述细胞。
10.一种包含激酶插入结构域受体阳性内皮祖细胞和RepSox的细胞组合物。
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