[发明专利]用于细胞外分离的基于脂质的探针在审
申请号: | 201780075420.8 | 申请日: | 2017-12-05 |
公开(公告)号: | CN110036111A | 公开(公告)日: | 2019-07-19 |
发明(设计)人: | 郑斯扬;万源;程功 | 申请(专利权)人: | 宾夕法尼亚州立大学研究基金会 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12Q1/6806;C12Q1/6886 |
代理公司: | 北京天昊联合知识产权代理有限公司 11112 | 代理人: | 孙微;金小芳 |
地址: | 美国宾夕*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 标记探针 脂质 基底 探针 捕获探针 高亲和性 固定的 外囊 标签 细胞 脂质双层膜 分离细胞 固定标记 间隔物 捕获 | ||
1.一种从样品中分离细胞外囊泡的方法,该方法包括:
使标记探针与包含具有脂质双层的细胞外囊泡的样品相接触,其中所述标记探针被配置为用于与所述细胞外囊泡的所述脂质双层相结合,以便标记所述细胞外囊泡;
用捕获探针捕获经标记的细胞外囊泡,所述捕获探针被配置为用于与所述标记探针相结合;以及
分离用所述捕获探针捕获的所述经标记的细胞外囊泡。
2.根据权利要求1所述的方法,进一步包括从所述捕获探针中释放所述经标记的细胞外囊泡。
3.根据权利要求1所述的方法,其中所述捕获探针包括磁性颗粒、金属颗粒、抗原包覆的颗粒和带电颗粒。
4.根据权利要求1所述的方法,其中所述标记探针进一步包括脂质尾部、间隔物和标签。
5.根据权利要求4所述的方法,其中所述捕获探针具有对所述标签具有高结合亲和性的分子。
6.根据权利要求4所述的方法,其中所述脂质尾部包括脂肪酸、甘油脂质、甘油磷酸脂质、固醇脂质、异戊烯醇脂质、鞘脂质、糖脂质、聚酮化合物、类二十烷酸、它们的衍生物或它们的任意组合。
7.根据权利要求4所述的方法,其中所述间隔物包括聚乙二醇。
8.一种分析细胞外囊泡的内容物的方法,该方法包括:
分离根据权利要求1至7中任一项所述的细胞外囊泡;
从所分离的细胞外囊泡中提取内容物;以及
分析所提取的内容物的结构和/或功能。
9.一种从样品中分离细胞外囊泡的方法,该方法包括:
使包含细胞外囊泡的样品与其上固定有标记探针的基底的表面相接触,其中所述标记探针被配置为用于与所述细胞外囊泡的脂质双层相结合,以便将所述细胞外囊泡固定在所述基底的所述表面上。
10.根据权利要求9所述的方法,其中所述标记探针包括脂质尾部、间隔物。
11.根据权利要求10所述的方法,其中所述表面具有对所述标记探针具有高结合亲和性的结合分子。
12.一种分析细胞外囊泡的内容物的方法,该方法包括:
固定根据权利要求9至11中任一项所述的细胞外囊泡;以及
测定依赖于固定在所述表面上的细胞外囊泡的一种或多种所述内容物的浓度的参数。
13.根据权利要求12所述的方法,进一步包括使脂质双层渗透性荧光标志物与固定在所述表面上的所述细胞外囊泡相接触,所述荧光标志物对固定在所述表面上的所述细胞外囊泡中的给定分子具有高结合亲和性。
14.根据权利要求13所述的方法,其中所述参数为与固定在所述表面上的所述细胞外囊泡中的所述给定分子相结合的所述荧光标志物的总荧光强度。
15.一种用于从样品中分离细胞外囊泡的装置,该装置包括:
其上固定有标记探针的基底表面,所述标记探针被配置为用于与所述细胞外囊泡的脂质双层相结合;以及
流体流动路径,其被配置为用于为包含细胞外囊泡的样品提供流动路径以接触所述基底表面。
16.根据权利要求15所述的装置,进一步包括:第一电极,其包括所述基底的囊泡固定表面;以及第二电极,其具有与所述第一电极相反的极性,所述装置被配置为用于使用所述第一电极和所述第二电极向所述样品施加电场。
17.根据权利要求15至16中任一项所述的装置,其中所述标记探针包括脂质尾部和间隔物。
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