[发明专利]增加塑料降解的蛋白酶

权利要求书

1.蛋白酶变体，其具有在Y167R位置的氨基酸取代，其中所述位置参考SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列编号，并且其与SEQ ID NO:1的蛋白酶相比，表现出聚酯降解活性增加。

2.根据权利要求1所述的蛋白酶变体，其中所述蛋白酶包含至少一种选自以下的取代的组合：S104L+Y167R、D160E+Y167R、N102S+D160E+Y167R、S106T+D160E+Y167R、N107T+D160E+Y167R、N102S+S106T+D160E+Y167R、S106T+N107T+D160E+Y167R、N102S+N107T+D160E+Y167R、N102S+S106T+N107T+Y167R、N102F+S104L+D160E+Y167R、N102F+S104L+N107I+D160E+Y167R、N102S+S106T+N107T+D160E+Y167R、N102F+S104L+S106T+N107I+Y167R、N102F+S106T+N107T+D160E+Y167R、N102F+S104L+S106T+N107I+D160E+Y167R、N102F+S104L+S106T+N107I+G132I+Y167R和N102F+S104L+S106T+N107I+G132I+D160E+Y167R，其中所述位置参考SEQ ID NO:1的氨基酸序列编号。

3.根据权利要求1所述的蛋白酶变体，其中所述蛋白酶包含单个氨基酸取代Y167R。

4.根据权利要求1所述的蛋白酶变体，其中所述蛋白酶在N-末端包含其他序列，所述氨基酸序列与SEQ ID NO：42所示的全长氨基酸序列具有100％的同一性。

5.根据权利要求1所述的蛋白酶变体，其中所述蛋白酶与SEQ ID NO:1的蛋白酶相比，表现出PLA降解活性增加。

6.编码权利要求1-5任一项所定义的蛋白酶变体的核酸。

7.包含权利要求6所述的核酸的表达盒或载体。

8.包含权利要求6所述的核酸或权利要求7所述的表达盒或载体的宿主细胞，其中所述宿主细胞不是植物细胞。

9.包含权利要求1-5任一项所定义的蛋白酶变体，或根据权利要求8所述的宿主细胞，或其包含所述蛋白酶变体的提取物的组合物。

10.一种产生蛋白酶的方法，包括：

在适于表达编码所述蛋白酶的核酸的条件下培养根据权利要求8所述的宿主细胞。

11.根据权利要求10所述的方法，其中所述方法进一步包括从细胞培养物回收所述蛋白酶。

12.一种降解包含至少一种聚酯的塑料产品的方法，包括：

将所述塑料产品与根据权利要求1-5任一项所述的蛋白酶或根据权利要求8所述的宿主细胞或根据权利要求9所述的组合物或具有SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列的蛋白酶接触。

13.根据权利要求12所述的方法，其中所述方法进一步包括回收单体和/或低聚物。

14.权利要求12或13所述的方法，其中所述塑料产品包含至少一种选自以下的聚酯：聚乳酸(PLA)、聚对苯二甲酸丙二醇酯(PTT)、聚对苯二甲酸丁二醇酯(PBT)、聚对苯二甲酸乙二醇酯(PEIT)、聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)、聚羟基链烷酸酯(PHA)、聚丁二酸丁二醇酯(PBS)、聚丁二酸丁二酸己二酸酯(PBSA)、聚对苯二甲酸丁二醇酯(PBAT)、聚乙烯呋喃酯(PEF)、聚己内酯(PCL)、聚(己二酸乙二醇酯)(PEA)和这些材料的共混物/混合物。