[发明专利]新的内溶素

说明书

本发明涉及具有内溶素活性和根据SEQ ID No.1的氨基酸序列的多肽及其片段或衍生物。此外，本发明涉及编码所述多肽的核酸分子、包含所述核酸分子的载体和包含所述核酸分子或所述载体的宿主细胞。此外，本发明涉及所述多肽，其用作药物，特别是用于治疗或预防革兰氏阴性细菌感染、用作诊断手段、用作化妆用物质或用作消毒剂。本发明还涉及所述多肽用于处理或防止以下各项的细菌污染，特别是革兰氏阴性污染的用途：食品、食物加工设备、食物加工厂、与食品接触的表面、医疗装置、医院和医生诊室中的表面。此外，本发明涉及包含所述多肽的药物组合物。

发明领域

本发明涉及具有内溶素活性和根据SEQ ID No.1的氨基酸序列的多肽及其片段或衍生物。此外，本发明涉及编码所述多肽的核酸分子、包含所述核酸分子的载体和包含所述核酸分子或所述载体的宿主细胞。此外，本发明涉及所述多肽，其用作药物，特别是用于治疗或预防革兰氏阴性细菌感染、用作诊断手段、用作化妆品物质或用作消毒剂(sanitizingagent)。本发明还涉及所述多肽用于处理或防止以下各项的细菌污染，特别是革兰氏阴性污染的用途：食品、食物加工设备、食物加工厂、与食品接触的表面、医疗装置、医院和医生诊室中的表面。此外，本发明涉及包含所述多肽的药物组合物。

发明背景

由细菌病原体引起的危及生命的人传染病现在部分由于对抗生素的抗性增加而重新出现。革兰氏阴性细菌对应于耐药性病原体的显著部分，并已成为导致由传染病引起的发病率和死亡率增加的主要公共健康威胁。已经提出了许多努力，但即使如此，多药物抗性革兰氏阴性细菌的比例在全世界仍在上升，并且已成为一个增长的问题。与革兰氏阳性细菌发生的情况相比，缺乏或甚至不存在特别针对多药物抗性革兰氏阴性细菌开发的新型活性抗生素，并因此，现在在临床样品和环境中分离的分类为泛耐药性隔离群(isolate)(即对所有可用抗生素都有抗性的细菌)的革兰氏阴性生物体的数目在增长。

革兰氏阴性细胞壁由外膜构成，所述外膜是大多数抗微生物剂的主要障碍。除了少数例外，外膜由以下组成：磷脂(内小叶)、脂多糖(LPS)(外小叶)和与肽聚糖共价结合并锚定到内小叶的蛋白质如孔蛋白(充当缓和通道(defusing channel))和脂蛋白的不对称膜。LPS是外膜的主要组分并且对于许多外部试剂为细菌提供渗透性屏障。LPS是极其多样的结构，其可以响应于当时的环境条件进行修改(Nikaido,2003)。三个不同的区域可以根据它们的化学结构、生物合成、遗传学和功能而区分：i)脂质A组分，ii)核心区域和iii)O-抗原，也称为O-特异性多糖或O-侧链。LPS可以呈现为粗糙(R-型，无O-抗原)、平滑(S-型，有O-抗原)或混合物(SR-型)。总体外膜完整性由两个主要稳定力维持，即LPS阳离子结合位点(离子相互作用)和脂质A酰基链基团的致密疏水堆积(疏水相互作用)，并且作用为有效的扩散屏障功能，作为针对抗微生物剂的天然屏障。因此，需要针对革兰氏阴性细菌有活性的新抗微生物剂。

用作“酶抗生素(enzybiotics)”——“酶”和“抗生素”的杂合术语——的内溶素完美地满足了此需求。内溶素是由所有双链DNA噬菌体编码的特化的肽聚糖降解酶(Young etal.,Trends Microbiol.2000Mar；8(3):120-128)。内溶素介导的作用是由其他蛋白质协调且调节的事件以在噬菌体复制周期结束时降解和损害细菌肽聚糖(PG)层。根据它们的活性和它们水解的键，内溶素可以分为不同的类别：i)糖苷酶，其在N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)的还原末端或在N-乙酰胞壁酸(MurNAc)的还原末端切割聚糖组分；ii)N-乙酰基-β-D-胞壁质酶(通常称为溶菌酶或胞壁质酶)，其与裂解性转糖苷酶共享相同的聚糖靶标，但提供不同的终产物；iii)酰胺酶，其催化MurNAc和L-丙氨酸之间的关键酰胺键的水解，从而将聚糖链与茎肽分开；和iv)不同类别的内肽酶和羧肽酶，其攻击交联细胞壁的茎肽中的LD-和DD-键。