[发明专利]用于乙醇生产的改良酵母菌株

权利要求书

1.一种重组酵母细胞，其包含：

a)编码具有甘油-3-磷酸脱氢酶活性的酶的基因，其中所述酶对至少NADP⁺和/或对NADPH具有辅因子依赖性；

b)编码具有至少NAD⁺依赖性乙酰化乙醛脱氢酶活性(EC 1.2.1.10)的酶的基因；以及

c)在选自GPD1和GPD2的组的至少一个基因中的突变或破坏。

2.根据权利要求1所述的细胞，其中所述具有甘油-3-磷酸脱氢酶活性的酶对NADPH比对NADH具有更高的亲和力和/或更低的米氏常数和/或更高的最大活性。

3.根据权利要求1或2所述的细胞，其中所述编码具有甘油-3-磷酸脱氢酶活性的酶的基因包含至少一个外源基因。

4.根据权利要求3所述的细胞，其中所述基因编码具有根据SEQ IDNO:1的氨基酸序列的酶或所述酶的具有至少50％序列同一性的功能同源物。

5.根据权利要求1或2所述的细胞，其中所述编码具有至少NAD⁺依赖性乙酰化乙醛脱氢酶活性的酶的基因编码具有根据SEQ ID NO:2的氨基酸序列的酶或所述酶的具有至少50％序列同一性的功能同源物。

6.根据权利要求1或2所述的细胞，与其相应的野生型细胞相比，所述细胞不含NADPH依赖性醛还原酶活性(EC 1.2.1.4)或具有降低的NADPH依赖性醛还原酶活性(EC 1.2.1.4)。

7.根据权利要求1或2中任一项所述的细胞，其中所述细胞的基因组包含ALD6或其具有至少50％序列同一性的功能同源物中的突变。

8.根据权利要求1或2所述的细胞，其中所述具有至少NAD⁺依赖性乙酰化乙醛脱氢酶活性的酶催化乙酰辅酶A向乙醛的可逆转化和随后乙醛向乙醇的可逆转化。

9.根据权利要求8所述的细胞，其中所述酶包括NAD⁺依赖性乙酰化乙醛脱氢酶(EC1.2.1.10)活性和NAD⁺依赖性醇脱氢酶活性(EC 1.1.1.1)两者。

10.根据权利要求1或2所述的细胞，其中所述编码具有至少NAD⁺依赖性乙酰化乙醛脱氢酶活性的酶的基因编码具有根据SEQ ID NO:3的氨基酸序列的酶或所述酶的具有至少50％序列同一性的功能同源物。

11.根据权利要求1或2所述的细胞，所述细胞不包含编码具有丙酮酸甲酸裂解酶活性的酶的基因。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的细胞用于制备塑料、有机酸、溶剂、动物饲料补充剂、药物、酶或化学原料的用途。

13.根据权利要求1至11中任一项所述的细胞用于制备乙醇、丁醇、乳酸、琥珀酸、维生素或氨基酸的用途。

14.一种用于制备发酵产物的方法，所述方法包括从可发酵的碳水化合物制备发酵产物，所述制备使用根据权利要求1至11中任一项所述的细胞在厌氧条件下进行。

15.根据权利要求14所述的方法，其中所述可发酵的碳水化合物获自淀粉、木质纤维素和/或果胶。

16.根据权利要求14或15所述的方法，其中所述可发酵的碳水化合物选自以下项的组：葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖、木糖、阿拉伯糖、半乳糖、纤维二糖和甘露糖。

17.根据权利要求16所述的方法，其中葡萄糖的浓度为80g/L或更高。

18.根据权利要求14或15所述的方法，其中所述发酵产物是乙醇。