[发明专利]生物体选择性生长培养基在审
申请号: | 201780078646.3 | 申请日: | 2017-12-18 |
公开(公告)号: | CN110177867A | 公开(公告)日: | 2019-08-27 |
发明(设计)人: | V·马思;D·格罗夫普赖斯 | 申请(专利权)人: | 绿洲科技有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12Q1/04 |
代理公司: | 永新专利商标代理有限公司 72002 | 代理人: | 王健 |
地址: | 英国*** | 国省代码: | 英国;GB |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 选择性生长 霍乱弧菌 生长培养基 生物体 | ||
本发明涉及用于分离产毒霍乱弧菌的选择性和/或差异生长培养基,以及用于从样品中分离和/或鉴定和/或选择性生长产毒霍乱弧菌的方法。
技术领域
本发明涉及用于分离产毒霍乱弧菌(Vibrio cholerae)的选择性和/或差异生长培养基,以及用于从样品中分离和/或鉴定和/或选择性生长产毒霍乱弧菌的方法。
简介
霍乱弧菌是弧菌科(Vibrionaceae)的成员之一,且是兼性厌氧的革兰氏阴性细菌。大多数弧菌菌种在河口和海洋环境中普遍存在,尽管已经在淡水中鉴定出弧菌,但前提是存在一定的最低水平的钠离子1。
特别重要的是,摄入被霍乱弧菌的某些菌株污染的水或食物会导致霍乱,霍乱会引起急性腹泻,且如果不加以治疗可在数小时内导致死亡。据研究人员估计,全世界每年有140万至430万病例,且有28000至142000人死于霍乱2。提供安全的饮用水和环境卫生对于预防这种极端致命的疾病的传播是至关重要的。
基于霍乱弧菌的脂多糖(LPS)的O抗原可以从血清学上对霍乱弧菌进行分类。事实上,根据O抗原的抗原性,在水生环境中存在多于两百种霍乱弧菌的血清群,鉴定为霍乱弧菌O1至O200。然而,在这两百种不同的血清型中,只有O1和O139菌株亚群是致病的3。此外,致病的O1血清群被细分为两种表型不同的生物型,埃尔托型和古典型。这两种生物型可进一步被细分为两种血清型,稻叶型和小川型。这些血清型在凝集和杀弧菌抗体测试中基于它们主要的耐热性LPS菌体抗原被区分。霍乱菌群具有共同的抗原A,而血清型由类型特异性抗原来区分,B为小川型且C为稻叶型。普遍认为O139源自埃尔托生物型,但失去了特性O1菌体抗原,同时获得了产生多糖荚膜的能力4。
在1992年以前,人们认为霍乱仅由稻叶型和小川型引起,但在1992年,由O139引起的霍乱在印度和孟加拉国以流行的比例出现。然而,尽管由O139血清群引起的疾病是毁灭性的,但埃尔托型菌株仍然是全球主导的菌株3。霍乱弧菌的其它血清群可以引起腹泻疾病和其它病理学,但与流行性霍乱无关。
船舶收集压载水以调节其稳定性。然而,港口处压载水的排放已经成为在世界范围内对人类健康有明显影响的大量非本地和不期望的生物体(诸如霍乱弧菌)的地理迁移的原因。正是这样的经历史证明的风险促使国际海事组织(IMO)在2004年2月14日通过了《船舶压载水和沉积物控制和管理国际公约(International Convention for theControl and Management of Ships'Ballast Water and Sediments)(BWM)》。BWM旨在通过建立用于管理和控制船舶压载水和沉积物的标准和程序,来防止病原生物体从一个地区传播到另一个地区。特别地,公约的规则D-2建立了特定微生物的数值表示的压载水排放标准。对于产毒霍乱弧菌(O1及O139),该限值为少于每100毫升1个菌落形成单位(cfu)或少于每1克(湿重)浮游动物样品1cfu5。在船舶的整个使用过程中都需要遵守。此外,通常测试不能在船上进行,而是需要将样品送到实验室。在较偏远的地区,这可能特别困难。此外,实验室测试通常很慢,迫使船舶在港口长期停留,造成严重的航运中断,耗费惊人的成本。
因此,需要一种简单而有效的测试,其能够快速检测压载水中的非常小的量(<1CFU/ml或<1CFU/g)的具体地产毒O1或O139霍乱弧菌。
一旦致病霍乱弧菌在港口被释放,它便可通过粪口途径迅速传播,特别是在卫生条件差的地区。在这一点上,快速的细菌学诊断对预防潜在的流行性暴发至关重要。同样,需要一种能够特定地鉴定患者群体中的致病霍乱弧菌的快速诊断测试。
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