[发明专利]改进的无甘油的乙醇生产

权利要求书

1.一种重组细胞，优选重组酵母细胞，所述重组细胞包含：

a)一种或多种编码甘油脱氢酶的异源基因；

b)一种或多种编码二羟基丙酮激酶(E.C.2.7.1.28和/或E.C.2.7.1.29)的基因；

c)一种或多种编码核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶加氧酶(EC4.1.1.39，RuBisCO)的异源基因；以及

d)一种或多种编码磷酸核酮糖激酶(EC2.7.1.19,PRK)的异源基因；以及任选地

e)一种或多种编码甘油转运体的异源基因。

2.根据权利要求1所述的细胞，所述细胞包括对编码甘油输出蛋白的一种或多种内源核苷酸序列的缺失或破坏。

3.根据权利要求1或2所述的细胞，其中所述甘油脱氢酶是NAD+连接的甘油脱氢酶(EC1.1.1.6)或NADP⁺连接的甘油脱氢酶(EC1.1.1.72)。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的细胞，所述细胞包含提高二羟基丙酮激酶在所述细胞中的比活性的遗传修饰。

5.根据前述权利要求中任一项所述的细胞，所述细胞包含对编码甘油激酶(EC2.7.1.30)的一种或多种内源核苷酸序列的缺失或破坏。

6.根据前述权利要求中任一项所述的细胞，所述细胞包含对编码甘油-3-磷酸脱氢酶的一种或多种内源核苷酸序列的缺失或破坏，所述甘油-3-磷酸脱氢酶优选属于EC1.1.5.3，诸如gut2，或属于EC1.1.1.8，诸如PDP1/2，所述细胞优选不含编码NADH依赖性甘油3-磷酸脱氢酶的基因。

7.根据前述权利要求中任一项所述的细胞，所述细胞包含对编码甘油-3-磷酸磷酸水解酶(GPP1/2)的一种或多种内源核苷酸序列的缺失或破坏。

8.根据前述权利要求中任一项所述的细胞，所述细胞包含编码由氨基酸序列SEQ IDNO:7或所述氨基酸序列的具有至少50％的序列同一性的功能同源物表示的异源甘油转运体的一种或多种核酸序列。

9.根据前述权利要求中任一项所述的细胞，所述细胞包含编码由氨基酸序列SEQ IDNO:8或所述氨基酸序列的具有至少50％的序列同一性的功能同源物表示的异源甘油转运体的一种或多种核酸序列。

10.根据前述权利要求中任一项所述的细胞，所述细胞为酵母细胞。

11.根据前述权利要求中任一项所述的细胞，所述细胞选自Saccharomycetaceae，特别地选自：Saccharomyces，诸如Saccharomyces cerevisiae；Kluyveromyces，诸如Kluyveromyces marxianus；Pichia，诸如Pichia stipitis或Pichia angusta；Zygosaccharomyces，诸如Zygosaccharomyces bailii；以及Brettanomyces，诸如Brettanomyces intermedius；Issatchenkia，诸如Issatchenkia orientalis，以及Hansenula。

12.根据前述权利要求中任一项所述的细胞，所述细胞还包含一种或多种编码分子伴侣的基因，优选异源基因，所述分子伴侣优选源自原核生物，更优选细菌，甚至更优选E.coli，优选所述分子伴侣选自由以下项组成的组：GroEL、GroES、GroEL的功能同源物，以及GroES的功能同源物。