[发明专利]用于分离和处理颗粒靶标的方法和装置

说明书

一种使用装置来分离和处理颗粒靶标的方法，所述装置包括：包括尖端孔和内腔的至少一个毛细管、能够定位毛细管尖端孔的定位元件、能够将处理液从毛细管排出以及将处理液吸入毛细管中的排出/吸入元件，其中，所述内腔包括处理液，所述方法包括以下步骤：a.设置待分离和处理的颗粒靶标，b.使用定位元件定位毛细管的尖端孔，使得毛细管的尖端孔接近颗粒靶标，c.排出一定量的处理液，以便将颗粒靶标封闭在处理液中，d.将封闭在处理液中的颗粒靶标吸入毛细管的内腔中，e.在包括处理液的毛细管内腔内对颗粒靶标进行处理。

技术领域

本发明涉及一种使用毛细管细胞分选装置分离和处理位于基体上的颗粒靶标的方法。

背景技术

来自肿瘤、内皮组织、组织细胞、干细胞和其他材料的分离细胞是医学诊断应用或生命科学研究中用于分析和病人资料收集的先决条件。然而，分离单颗粒靶标(例如细胞)的当前方法更经常地对应于富集方法，而不是真正分离单细胞。

例如，设计成从体液(例如血液)中按照大小分离上皮性肿瘤细胞(例如循环癌细胞(CTC))的过滤器被Rarecells SAS商业化，并且实际上富集了这种细胞。这意味着被捕获在过滤器中的多个细胞在细胞类型和基因学方面都不相同。因此，不可能批量分析收集的细胞，并因此必须单独分离各个细胞以确定其基因类型。

还可以通过激光显微切割方法从组织样本分离单细胞或细胞簇，该激光显微切割方法存在多种变型。例如，WO2006031574A1描述了使用一种特殊的基于激光的技术(称为激光捕获显微切割)，在该技术中能够通过利用热塑性膜的IR激光诱导转移从生物组织样本提取小细胞区。EP 0 879 408 B1中描述的另一种变型在于称为激光弹射器技术的技术。第一，使用激光在感兴趣区域(例如组织样本中的细胞)的周围切割，第二，通过使用激光脉冲将该区域弹射到收集容器中。DE 10003588 C1公开了一种激光显微切割技术，在该技术中，在第一步骤中，使用激光从膜载玻片上的组织样本切出细胞，并且在第二步骤中，通过将切割区域粘附到粘附帽上来分离该细胞，并随后使用裂解缓冲液提取细胞组分(如DNA或RNA)，用于进一步的基因分析。

所有以上方法都需要两个不连续的步骤：从靶细胞的环境和/或基体选择并且分离该靶细胞的第一步骤和随后的将靶细胞转移到单独容器的第二步骤，然后，在该单独容器中将例如裂解缓冲液的处理液添加到先前分离出的靶细胞。这些方法是劳动密集型的，即使是自动化的，也需要使用额外的容器和材料，例如转移箔和试管。

尽管已经使用激光显微切割从组织样本切出细胞，但这些方法不适合从细胞培养容器的底部分离贴壁细胞，特别是培养细胞。

因此，期望提供一种方法以及合适的装置，通过该方法和装置能够以更有效且简单的方式分离和处理单颗粒靶标(例如细胞)，以简化对这种单颗粒靶标的处理。

发明内容

本发明的方法和装置通过提供一种方法和装置克服了以上问题，在该方法和装置中同时进行靶颗粒(例如细胞)的分离和处理，实质上是通过将颗粒靶标吸入填充有处理液的毛细管中并且在毛细管内进行处理，而不是将颗粒靶标转移到单独的容器进行处理。

因此，本发明的目的是提供一种使用装置来分离和处理优选位于基体上的颗粒靶标的方法，所述装置包括：

包括尖端孔和内腔的至少一个毛细管，所述内腔包括处理液，

定位元件，能够定位毛细管的尖端孔，

排出/吸入元件，能够将液体从毛细管排出以及将液体吸入毛细管中，

所述方法包括以下步骤：

a.将待分离和处理的颗粒靶标设置在基体上；

b.使用定位元件定位毛细管的尖端孔，使得毛细管的尖端孔接近颗粒靶标；

c.使用排出/吸入元件优选从毛细管的内腔排出足够量的处理液，以便将颗粒靶标基本封闭在处理液中；