[发明专利]磁性免疫球蛋白-结合粒子

说明书

本发明公开一种免疫球蛋白‑结合磁珠，其包含多孔基质和一个或多个嵌入所述基质的磁性粒子，其中所述基质包含多孔聚合物和共价偶联于所述多孔聚合物的至少10 mg/ml Fc‑结合蛋白配体。

同时待审申请的参考

我们同时待审的申请(待审案件编号317996-2)通过引用以其整体并入本文。

本发明的技术领域

本发明涉及分离树脂，且更特别涉及用于分离免疫球蛋白的磁性分离树脂。本发明还涉及分离免疫球蛋白和其它目标生物分子的方法以及执行此类方法的设备。

发明背景

用于生物分子的磁性吸附珠早已为人们所熟知，且通常用于例如蛋白质的小规模实验室分离，特别是用于并行分离，其中磁格式可以通过机器人实现自动化。然而，由于缺乏合适的珠和工艺设计，磁珠通常不用于生物药物的大规模分离。

因此，需要磁性吸附珠，其适合用于生物药物的大规模处理，特别是用于大量的产品，如单克隆抗体。还需要使用磁性吸附珠的适当的大规模生物药物分离过程。

发明概述

本发明的一个方面是提供一种能够以高结合强度和高结合容量结合免疫球蛋白的磁珠。这用免疫球蛋白-结合磁珠实现，其包含多孔基质和一个或多个嵌入基质的磁性粒子，其中基质包含多孔聚合物和共价偶联于多孔聚合物的至少10 mg/ml Fc-结合蛋白配体。

一个优点是所述珠可以直接从具有高抗体滴度的未澄清的细胞培养物中选择性地结合大量免疫球蛋白。另一个优点是，所述珠对免疫球蛋白具有有利的吸附等温线，得到高收率的回收的免疫球蛋白。

本发明的第二个方面是提供一种从细胞培养物中捕获目标生物分子的有效方法，而无需事先澄清细胞培养物。这用一种从细胞培养物中分离目标生物分子的方法来实现，其包括以下步骤：

a) 提供多个能够结合目标生物分子的磁珠；

b) 使多个珠与包含目标生物分子的细胞培养物接触，以使目标生物分子与珠结合。步骤b)可在生物反应器容器中执行和/或细胞培养物可以是未澄清的或细胞-耗竭的；

c) 用磁场保留珠并用洗涤液洗涤珠；

d) 用洗脱剂洗脱珠，以从珠解吸目标生物分子，并回收洗脱液中的目标生物分子。

本发明的第三个方面是提供磁珠在分离免疫球蛋白中的用途。这是通过权利要求书中定义的用途来实现的。

本发明的第四个方面是提供一种在不需要事先澄清细胞培养物的情况下用于从细胞培养物中捕获目标生物分子的设备。这是通过包括与接触器流体连接的生物反应器的设备来实现的，其中接触器与高梯度磁场分离器(HGMS)流体连接。

附图

图1显示根据本发明的珠的示意图。该图还显示了磁性粒子是如何集中在珠的中心区域的。

图2显示根据本发明的磁性琼脂糖珠的显微照片。

图3显示本发明方法的流程图。

图4显示本发明的设备。

图5显示本发明的设备。

图6显示本发明的设备。

图7显示本发明的设备。

图8显示本发明的设备。

图9显示本发明的设备。

图10显示本发明的设备。

图11显示根据本发明的合并的接触器/分离器。

图12显示根据本发明的两个合并的接触器/分离器。