[发明专利]抑制畸胎瘤形成的多能干细胞衍生的神经前体细胞的制备方法在审

专利信息
申请号: 201780081462.2 申请日: 2017-12-20
公开(公告)号: CN110139928A 公开(公告)日: 2019-08-16
发明(设计)人: 曺明洙;林美善;池素蓮 申请(专利权)人: 第一药品株式会社
主分类号: C12N5/0793 分类号: C12N5/0793;C12N5/00
代理公司: 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 11201 代理人: 宋融冰
地址: 韩国*** 国省代码: 韩国;KR
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摘要:
搜索关键词: 神经前体细胞 制备 畸胎瘤 多能干细胞 存活率 回收率 细胞
【权利要求书】:

1.一种抑制畸胎瘤形成的神经前体细胞的制备方法,其特征在于,包括:

步骤1),对神经前体细胞进行单细胞化;

步骤2),对在上述步骤1)的单细胞化的神经前体细胞进行再凝集;以及

步骤3),对在上述步骤2)的再凝集的神经前体细胞进行回收。

2.根据权利要求1所述的抑制畸胎瘤形成的神经前体细胞的制备方法,其特征在于,上述抑制畸胎瘤形成的神经前体细胞的制备方法使用含有N-2添加剂、bFGF或其混合物的培养基作为细胞的培养用培养基。

3.根据权利要求2所述的抑制畸胎瘤形成的神经前体细胞的制备方法,其特征在于,上述N-2添加剂的添加量为0.5%(v/v)至2.0%(v/v)。

4.根据权利要求2所述的抑制畸胎瘤形成的神经前体细胞的制备方法,其特征在于,上述bFGF的添加量为0.0002%(w/v)至0.001%(w/v)。

5.根据权利要求1所述的抑制畸胎瘤形成的神经前体细胞的制备方法,其特征在于,上述步骤1)在涂敷有底物的培养皿中进行。

6.根据权利要求5所述的抑制畸胎瘤形成的神经前体细胞的制备方法,其特征在于,上述底物为选自由层粘连蛋白、L-鸟氨酸、基质胶及CeLLstart组成的组中的一种以上。

7.根据权利要求1所述的抑制畸胎瘤形成的神经前体细胞的制备方法,其特征在于,所述步骤2)在未涂敷有底物的培养皿中进行。

8.根据权利要求1所述的抑制畸胎瘤形成的神经前体细胞的制备方法,其特征在于,上述步骤3)的再凝集的神经前体细胞的直径为10μm至80μm。

9.一种神经前体细胞,其特征在于,通过根据权利要求1所述的抑制畸胎瘤形成的神经前体细胞的制备方法制备而成。

10.一种神经细胞的分化方法,其特征在于,包括:

步骤1),对神经前体细胞进行单细胞化;

步骤2),对在上述步骤1)的单细胞化的神经前体细胞进行再凝集;

步骤3),对在上述步骤2)的再凝集的神经前体细胞进行回收;以及

步骤4),将在上述步骤3)的回收的神经前体细胞分化为神经细胞。

11.根据权利要求10所述的神经细胞的分化方法,其特征在于,上述分化在加入B27来代替bFGF的培养基中进行。

12.根据权利要求11所述的神经细胞的分化方法,其特征在于,上述B27的添加量为1%(v/v)至3%(v/v)。

13.根据权利要求10所述的神经细胞的分化方法,其特征在于,在上述神经前体细胞直径为500μm以上时进行传代。

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