[发明专利]用于细胞重编程的方法和组合物

权利要求书

1.一种将细胞从第一细胞类型重编程为第二细胞类型的方法，其包括使所述细胞接触：

a)与基因的靶位点杂交的第一指导RNA，其中所述基因编码有助于所述细胞的细胞类型特异性功能的蛋白质；以及

b)在所述靶位点处切割所述基因的链的Cas核酸酶，

其中切割所述链改变所述基因的表达，使得所述细胞不再能执行所述细胞类型特异性功能，从而将所述细胞重编程为所述第二细胞类型。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述基因包含突变。

3.如权利要求2所述的方法，其中所述第一细胞类型对所述突变敏感，并且其中所述第二细胞类型是对所述突变有抗性的细胞类型。

4.如权利要求2所述的方法，其中所述突变仅在所述第一细胞类型中导致不利影响。

5.如权利要求4所述的方法，其中所述不利影响选自衰老、凋亡、缺乏分化和异常细胞增殖。

6.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述基因编码转录因子。

7.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述第一细胞类型和所述第二细胞类型是紧密相关的、终末分化的成熟细胞类型。

8.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述重编程在体内发生。

9.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述重编程在体外或离体发生。

10.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述细胞为胰腺、心脏、脑、眼、肠、结肠、肌肉、神经系统、前列腺或乳腺的细胞。

11.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述细胞为有丝分裂后的细胞。

12.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述细胞为眼睛中的细胞。

13.如权利要求12所述的方法，其中所述细胞为视网膜细胞。

14.如权利要求13所述的方法，其中所述视网膜细胞为视杆。

15.如权利要求14所述的方法，其中所述细胞类型特异性功能为夜间视觉或颜色视觉。

16.如权利要求12所述的方法，其中所述基因选自NRL、NR2E3、GNAT1、RORβ、OTX2、CRX和THRB。

17.如权利要求12所述的方法，其中所述基因选自NRL和NR2E3。

18.如权利要求12所述的方法，其中所述第一细胞类型为视杆。

19.如权利要求12所述的方法，其中所述第一细胞类型为中间神经元。

20.如权利要求12所述的方法，其中所述第二细胞类型为视锥。

21.如权利要求12所述的方法，其中所述第二细胞类型为中间细胞。

22.如权利要求12所述的方法，其中所述第一细胞类型为视杆，并且所述第二细胞类型为视锥。

23.如权利要求22所述的方法，其中所述视锥使受试者能够具有明视觉。

24.如权利要求12所述的方法，其中所述第一细胞类型为视杆，并且所述第二细胞类型为多能细胞。