[发明专利]具有降低的脱靶效应的修饰的RNA试剂

权利要求书

1.一种能够抑制靶基因表达的双链RNA(dsRNA)分子，该双链RNA分子包含有义链和反义链，每条链具有14至40个核苷酸，其中该反义链与靶序列具有足够的互补性以介导RNA干扰，其中所述反义链在5'区域的前9个核苷酸位置内包含双链体的至少一个热去稳定化修饰或其前体，其中所述有义链包含ASGPR配体。

2.根据权利要求1所述的dsRNA分子，其中该dsRNA包含至少四个2’-氟。

3.根据权利要求2所述的dsRNA分子，其中在该反义链的核苷酸位置3-9处没有2’-氟修饰。

4.根据权利要求1所述的dsRNA分子，该dsRNA分子具有以下特征：

a)该双链体的热去稳定化修饰位于该反义链的5′区域的位置4-8；

b)并且该有义链和反义链的每个包含至少两个2’-氟修饰；和

c)附接至该有义链的任一末端的ASGPR配体。

5.根据权利要求4所述的dsRNA分子，其中在该反义链的核苷酸位置3-9处没有2’-氟修饰。

6.根据权利要求1所述的dsRNA分子，其中该反义链具有以下特征中的至少两个：

a)该双链体修饰的热去稳定化修饰位于该反义链的位置4至8；

b)至少两个2’-氟修饰；

c)在核苷酸位置1与2(从5’末端开始计数)之间的硫代磷酸酯核苷酸间键；

d)该反义链的长度为18至35个核苷酸。

7.根据权利要求6所述的dsRNA分子，其中在该反义链的核苷酸位置3-9处没有2’-氟修饰。

8.根据权利要求1所述的dsRNA分子，其中该有义链具有以下特征中的至少一个：

a)附接至该有义链的任一末端的ASGPR配体；

b)至少两个2’-氟修饰；

c)该有义链和该反义链显示出足够的互补性以形成跨至少19个核苷酸位置的双链区，并且其中该双链体的热去稳定化修饰位于所述双链区域内。

9.根据权利要求8所述的dsRNA分子，其中在该反义链的核苷酸位置3-9处没有2’-氟修饰。

10.根据权利要求1所述的dsRNA分子，其中该双链体的热去稳定化修饰选自下组，该组由以下组成：

其中B是核碱基。

11.根据权利要求1所述的dsRNA分子，其中该稳定的修饰位于该反义链的位置7。

12.根据权利要求1所述的dsRNA分子，其中该ASGPR配体是通过二价或三价支链接头附接的一个或多个GalNAc衍生物。

13.根据权利要求8所述的dsRNA分子，其中该ASGPR配体是：

14.一种能够抑制靶基因表达的双链RNA分子，该双链RNA分子包含有义链和反义链，每条链具有14至40个核苷酸，其中该反义链与靶序列具有足够的互补性以介导RNA干扰，其中该反义链在5′区域的前9个核苷酸位置内包含双链体的至少一个热去稳定化修饰，并且该dsRNA具有从约40℃至约80℃的解链温度。

15.根据权利要求14所述的dsRNA分子，其中该dsRNA具有从约55℃至约67℃的解链温度。

16.根据权利要求1所述的dsRNA分子，其中在给药后第7天，至少50％的该反义链存在于肝中。