[发明专利]用于使用微毛细管阵列进行筛选的方法和系统有效
申请号: | 201780085952.X | 申请日: | 2017-12-11 |
公开(公告)号: | CN110268108B | 公开(公告)日: | 2022-09-06 |
发明(设计)人: | 珍妮弗·R·科克伦;鲍勃·陈;斯潘塞·凯莱布·奥尔福德 | 申请(专利权)人: | 埃克切拉生物科学公司 |
主分类号: | C40B40/02 | 分类号: | C40B40/02;G01N33/53;G01N33/543;G01N33/68 |
代理公司: | 北京银龙知识产权代理有限公司 11243 | 代理人: | 钟晶;宋琴芝 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 使用 毛细管 阵列 进行 筛选 方法 系统 | ||
1.一种筛选变体蛋白质群的方法,所述方法包括以下步骤:
提供包括多个微毛细管的微毛细管阵列,每个微毛细管包含变体蛋白质、固定化靶分子和报告元件,其中所述变体蛋白质以特定亲和力与所述固定化靶分子缔合,其中所述微毛细管内不含电磁辐射吸收材料,其中通过用激光器辐射感兴趣的微毛细管来分离感兴趣的微毛细管的内容物;以及
测量来自至少一个报告元件的指示至少一种变体蛋白质与至少一个固定化靶分子的缔合的信号以鉴别至少一个感兴趣的微毛细管。
2.根据权利要求1所述的方法,其中所述变体蛋白质由表达系统表达。
3.根据权利要求2所述的方法,其中所述表达系统是无细胞表达系统。
4.根据权利要求2所述的方法,其中所述表达系统是细胞表达系统。
5.根据权利要求4所述的方法,其中所述细胞表达系统是动物系统、真菌系统、细菌系统、昆虫系统或植物系统。
6.根据权利要求5所述的方法,其中所述细胞表达系统是酵母系统。
7.根据权利要求1所述的方法,其中所述变体蛋白质是可溶性蛋白质。
8.根据权利要求1所述的方法,其中所述靶分子是靶蛋白质或多肽、靶核酸、靶碳水化合物或每一种的组合。
9.根据权利要求1所述的方法,其中所述靶分子固定在表面上。
10.根据权利要求9所述的方法,其中所述表面是细胞的表面。
11.根据权利要求9所述的方法,其中所述靶分子是天然蛋白质。
12.根据权利要求9所述的方法,其中所述表面是珠粒的表面。
13.根据权利要求9所述的方法,其中所述表面是微毛细管壁的表面。
14.根据权利要求9所述的方法,其中所述表面是被配置成通过重力沉降而沉降在微毛细管中的表面。
15.根据权利要求1所述的方法,其中所述报告元件是经过标记的抗体或其它结合分子。
16.根据权利要求15所述的方法,其中所述经过标记的抗体或其它结合分子是经过荧光标记的抗体或其它结合分子。
17.根据权利要求15所述的方法,其中所述经过标记的抗体是第一抗体或第二抗体。
18.根据权利要求15所述的方法,其中所述经过标记的抗体或其它结合分子是酶联抗体或其它结合分子。
19.根据权利要求1所述的方法,其中所述报告元件在细胞内活化,并且所述靶分子固定在所述细胞的表面上。
20.根据权利要求19所述的方法,其中所述报告元件包括绿色荧光蛋白或变体。
21.根据权利要求1所述的方法,其中所述信号是荧光信号、吸光度信号、明视场信号或暗视场信号。
22.根据权利要求1所述的方法,其中所述微毛细管阵列中的每个微毛细管包含来自所述变体蛋白质群的0到5种变体蛋白质。
23.根据权利要求1所述的方法,其中所述微毛细管阵列包括至少100,000个、至少300,000个、至少1,000,000个、至少3,000,000个或至少10,000,000个微毛细管。
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